為提高青霉素的生產效率,我國某科研團隊構建了一株重組產黃青霉基因工程菌并申請專利。重組產黃青霉基因工程菌的構建方法步驟如下:①制備原始產黃青霉菌的原生質體;②提取原始產黃青霉菌的基因組DNA;③構建基因敲除片段;④將步驟③構建的基因敲除片段導入步驟①制備的產黃青霉的原生質體中,得到重組產黃青霉基因工程菌。請回答下列相關問題:
(1)制備原生質體需去除原始產黃青霉菌的 細胞壁細胞壁。
(2)鑒定DNA是否被提取出,可使用 二苯胺二苯胺試劑,鑒定原理是 在一定溫度下,DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色在一定溫度下,DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色。
(3)構建基因敲除片段時使用了重疊延伸PCR技術,該技術的常用過程如下:

該過程共需設計 44種引物,引物的作用是 使DNA聚合酶從引物的3'端開始結合脫氧核苷酸使DNA聚合酶從引物的3'端開始結合脫氧核苷酸。
(4)已知基因導入原生質體的方法與導入大腸桿菌的方法相似,則步驟④常用方法為 Ca2+處理法Ca2+處理法,培養(yǎng)獲得的重組產黃青霉基因工程菌時,需要將培養(yǎng)基調至 酸性酸性(填“酸性”、“中性”或“堿性”)。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定;基因工程的操作過程綜合.
【答案】細胞壁;二苯胺;在一定溫度下,DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色;4;使DNA聚合酶從引物的3'端開始結合脫氧核苷酸;Ca2+處理法;酸性
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/11/27 1:0:1組卷:9難度:0.5
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