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基因工程乙肝疫苗是乙肝表面抗原(HBsAg)亞單位疫苗,制作過程是采用現(xiàn)代生物技術(shù)將乙肝病毒表達(dá)表面抗原的基因進(jìn)行質(zhì)粒構(gòu)建,將其導(dǎo)入CHO細(xì)胞(中國倉鼠卵巢細(xì)胞)中,通過培養(yǎng)這種CHO細(xì)胞來表達(dá)乙肝表面抗原亞單位,從而獲得疫苗,基本流程如圖1所示。請回答下列問題。
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(1)要獲取HBsAg基因,除圖中方法外,還可以根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測
氨基酸序列
氨基酸序列
,進(jìn)而推測目的基因的脫氧核苷酸序列,再進(jìn)行人工合成。
(2)圖中①過程選用的限制酶是
HindⅢ和XhoⅠ
HindⅢ和XhoⅠ
,理由是
HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn),但限制酶SamⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上,若選用限制酶SmaⅠ則會(huì)破壞目的基因
HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn),但限制酶SamⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上,若選用限制酶SmaⅠ則會(huì)破壞目的基因

(3)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增HBsAg基因片段的前提條件是
要有一段已知目的基因的核苷酸序列
要有一段已知目的基因的核苷酸序列
,以便合成引物。圖2是某同學(xué)設(shè)計(jì)的一組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列):
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該組引物是否合理
,理由是
引物Ⅱ自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對,這影響了與模板的堿基互補(bǔ)配對
引物Ⅱ自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對,這影響了與模板的堿基互補(bǔ)配對
。
(4)若一個(gè)HBsAg基因通過PCR擴(kuò)增了4次,在子代基因中同時(shí)含有兩個(gè)引物的基因占
7
8
7
8
。
(5)HBsAg基因在CHO細(xì)胞中表達(dá)需要有特異性的
啟動(dòng)子
啟動(dòng)子
,控制基因表達(dá)的起始時(shí)間和表達(dá)程度。HBsAg基因能否在CHO細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是
CHO細(xì)胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
CHO細(xì)胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】氨基酸序列;HindⅢ和XhoⅠ;HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn),但限制酶SamⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上,若選用限制酶SmaⅠ則會(huì)破壞目的基因;要有一段已知目的基因的核苷酸序列;否;引物Ⅱ自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對,這影響了與模板的堿基互補(bǔ)配對;
7
8
;啟動(dòng)子;CHO細(xì)胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:22引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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