同源重組指發(fā)生在同源DNA分子的同源序列（即堿基序列相同或相近）之間的一種重組形式。某實(shí)驗(yàn)小組利用同源重組的方法將綠色熒光蛋白（EGFP）基因插入真核表達(dá)載體的過程如圖所示，其中A～D表示操作流程?；卮鹣铝袉栴}：
（1）載體線性化后進(jìn)行的PCR過程中引物的作用是 使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制不同，PCR反應(yīng)體系中需要加入 耐高溫的DNA聚合（或TaqDNA聚合）耐高溫的DNA聚合（或TaqDNA聚合）酶。
（2）圖中A、B兩處PCR過程中要在載體和目的基因的兩端添加 同源序列同源序列。重組產(chǎn)物一般會(huì)轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞，獲得感受態(tài)細(xì)胞時(shí)一般先用 Ca2+Ca2+處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（3）與利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒的常規(guī)方法相比，用該方法構(gòu)建重組質(zhì)粒的最大優(yōu)點(diǎn)是 構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不受目的基因以及載體上限制酶位點(diǎn)的限制構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不受目的基因以及載體上限制酶位點(diǎn)的限制。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；耐高溫的DNA聚合（或TaqDNA聚合）；同源序列；Ca2+；構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不受目的基因以及載體上限制酶位點(diǎn)的限制
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/5 8:0:9組卷：11引用：5難度：0.8
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1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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