浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn)，一種植物激素--油菜素內(nèi)酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后，許多參與農(nóng)藥降解的基因（如P450基因和紅霉素抗性基因）的表達(dá)和酶活性都得到提高，在這些基因“指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì)，有的則被直接排出體外。某課題進(jìn)行了如圖的操作，請(qǐng)回答下列問題：
（1）獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法 從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增（至少答出兩種）。步驟①用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因的前提是 要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成 引物引物；步驟②用到的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。
（2）圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是 感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化法感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化法，在導(dǎo)入之前應(yīng)用一定濃度的 氯化鈣溶液氯化鈣溶液處理受體細(xì)菌。
（3）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，在含有 目的基因的DNA片段上目的基因的DNA片段上用放射性同位素標(biāo)記制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入 紅霉素紅霉素可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；引物；限制酶和DNA連接酶；感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化法；氯化鈣溶液；目的基因的DNA片段上；紅霉素
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：2引用：3難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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