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基因工程技術(shù)應(yīng)用范圍越來越廣,請根據(jù)基因工程技術(shù)有關(guān)知識回答問題:
(1)目前,基因工程中使用的限制酶能將DNA每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的化學(xué)鍵斷開,從而產(chǎn)生黏性末端或平末端,能連接黏性末端和平末端的DNA連接酶是
T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
。
(2)為在短時間內(nèi)大量獲得目的基因,可用的技術(shù)是
PCR
PCR
,此技術(shù)需用
Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)
Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)
酶。目的基因獲取之后,需要進(jìn)行
構(gòu)建基因表達(dá)載體
構(gòu)建基因表達(dá)載體
,此步驟是基因工程的核心。質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:
AATTC……GG……CTTAA
為使運(yùn)載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性核酸內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點(diǎn)是
切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同
切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同
。
(3)將一段目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞,構(gòu)建重組質(zhì)粒時,目的基因和標(biāo)記基因都應(yīng)該位于Ti質(zhì)粒的
T-DNA
T-DNA
片段內(nèi),原因是
Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細(xì)胞的染色體
Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細(xì)胞的染色體
。要檢測目的基因在受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,檢測方法是采用
分子雜交技術(shù)
分子雜交技術(shù)
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】T4DNA連接酶;PCR;Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶);構(gòu)建基因表達(dá)載體;切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同;T-DNA;Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能夠整合到受體細(xì)胞的染色體;分子雜交技術(shù)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:1難度:0.7
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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