某種野生植物細胞中含有的抗煙草花葉病毒(TMV)蛋白基因能合成抗TMV蛋白,使該種植物葉片能抗TMV感染??蒲腥藛T利用基因工程技術將該種植物細胞中的抗TMV蛋白基因轉入煙草細胞,培育出了抗TMV的煙草,主要流程如圖所示。分析并回答下列問題:
(1)圖中過程①所需要的RNA應該是由該種植物細胞中的 抗TMV蛋白基因轉錄抗TMV蛋白基因轉錄而來的,過程①需要的酶有 逆轉錄酶和DNA聚合酶逆轉錄酶和DNA聚合酶(寫出2種)。
(2)過程②一般利用 PCRPCR技術擴增得到大量目的基因,該技術的原理是 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制。
(3)過程③中通常需要用兩種限制酶切割目的基因和質粒,目的是 使目的基因能定向插入表達載體,避免自身環(huán)化使目的基因能定向插入表達載體,避免自身環(huán)化。過程④常用的方法是 農桿菌轉化法農桿菌轉化法。
(4)過程⑤培養(yǎng)基中加入卡那霉素的作用是 篩選出導入了抗TMV蛋白基因且該基因成功表達的煙草細胞篩選出導入了抗TMV蛋白基因且該基因成功表達的煙草細胞。過程⑤獲得再生植株的生物技術是 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)。
【考點】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】抗TMV蛋白基因轉錄;逆轉錄酶和DNA聚合酶;PCR;DNA雙鏈復制;使目的基因能定向插入表達載體,避免自身環(huán)化;農桿菌轉化法;篩選出導入了抗TMV蛋白基因且該基因成功表達的煙草細胞;植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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