U-mir是家蠶體內的一種小分子非編碼RNA，可與某些RNA尾端的一段非編碼序列（3'-UTR）結合，進而影響基因的表達。為探究U-mir是否影響家蠶基因B（調控家蠶眼睛發(fā)育）的表達，科研人員將基因B中對應3'-UTR的DNA片段與熒光素酶基因（U-mir不影響熒光素酶基因的表達）重組后導入家蠶胚胎細胞觀察其表達結果。請回答下列問題：

（1）利用PCR技術擴增基因B對應3'-UTR的DNA片段，應先依據該基因的一段核苷酸序列合成

引物

引物

。
（2）利用

限制酶（或限制性內切核酸酶）和DNA連接酶

限制酶（或限制性內切核酸酶）和DNA連接酶

（填酶的種類）可將上述DNA片段插入熒光素酶基因表達載體（如圖1）上的

2

2

位點，構建重組載體。
（3）將重組載體與U-mir共同導入家蠶胚胎細胞，同時應設置兩個對照組，即將

熒光素酶基因表達載體

熒光素酶基因表達載體

、

重組載體

重組載體

分別導入兩組家蠶胚胎細胞。
（4）科研人員分別從實驗組和對照組細胞中提取蛋白質，經處理檢測后獲得相對熒光值（在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應并發(fā)出熒光），其結果如圖2。
依據實驗結果可推斷：

U-mir影響基因B的表達

U-mir影響基因B的表達

。分析可能原因：

U-mir與基因B所轉錄的mRNA的3'-UTR（根據堿基互補配對原則）結合，進而抑制基因B的表達（翻譯過程）

U-mir與基因B所轉錄的mRNA的3'-UTR（根據堿基互補配對原則）結合，進而抑制基因B的表達（翻譯過程）

。