枸杞子是應(yīng)用極為廣泛的一種中藥飲片，李時珍在《本草綱目》中把枸杞子的主要功效為“滋腎、潤肺、明目”，又曰“久服，堅筋骨，輕身不老，耐寒暑”。我國對中藥飲片中的微生物含量有明確規(guī)定，為調(diào)查某家藥店在售枸杞子的耐熱菌（100℃較短時間處理細菌中芽孢和孢子不會死亡）污染情況，進行如下實驗：
步驟一：取枸杞子樣品25g,加入適量的pH為7.0的氯化鈉蛋白胨緩沖液獲得樣品溶液，用無菌紗布過濾制備成待測液250mL。
步驟二：對待測液進行 沸水浴（100℃加熱處理）沸水?。?00℃加熱處理）較短的一段時間。
步驟三：快速冷卻后取待測液10mL以10倍梯度依次稀釋4次，各取0.1mL溶液涂布接種于4個胰酪大豆胨平板上，培養(yǎng)72h。
步驟四：觀察并進行計數(shù)。
回答問題：
（1）微生物計數(shù)的常用方法有 顯微鏡直接計數(shù)法（血細胞計數(shù)板計數(shù)法）顯微鏡直接計數(shù)法（血細胞計數(shù)板計數(shù)法）、稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法，其中后者的測量值比實際值偏小，因為 當(dāng)兩個或兩個以上細胞（細菌或真菌）連在一起時，培養(yǎng)基上觀察到的只是一個菌落（培養(yǎng)基上有個別的菌落不是單個的菌落/不是單菌落/不是由一個細胞繁殖而來）當(dāng)兩個或兩個以上細胞（細菌或真菌）連在一起時，培養(yǎng)基上觀察到的只是一個菌落（培養(yǎng)基上有個別的菌落不是單個的菌落/不是單菌落/不是由一個細胞繁殖而來）。
（2）將步驟二補充完整：沸水?。?00℃加熱處理）沸水?。?00℃加熱處理）。
（3）步驟三所用的培養(yǎng)基通常是在液體培養(yǎng)基中加入適量的 瓊脂瓊脂，并需對培養(yǎng)基進行滅菌。步驟三需同時設(shè)置 空白平板（接種等量無菌水的平板）空白平板（接種等量無菌水的平板）在相同條件下培養(yǎng)作為對照。
（4）計數(shù)微生物時稀釋倍數(shù)必須是適宜的，要保證能獲得菌落數(shù)為 30～30030～300之間的平板，因為這種情況下計數(shù)相對準確一些。
（5）已知4個平板上的菌落數(shù)分別為85、80、26、75個，則樣品所含耐熱菌數(shù)為 8×1078×107（個/g）。
【答案】沸水?。?00℃加熱處理）；顯微鏡直接計數(shù)法（血細胞計數(shù)板計數(shù)法）；稀釋涂布平板法；當(dāng)兩個或兩個以上細胞（細菌或真菌）連在一起時，培養(yǎng)基上觀察到的只是一個菌落（培養(yǎng)基上有個別的菌落不是單個的菌落/不是單菌落/不是由一個細胞繁殖而來）；沸水?。?00℃加熱處理）；瓊脂；空白平板（接種等量無菌水的平板）；30～300；8×107
【解答】
【點評】
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