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為了研究低溫誘導對某基因的啟動子P活性的影響，科研人員進行了啟動子P的PCR提取、特定表達載體的構建和轉基因煙草的功能鑒定。該基因及其啟動子P的結構及相應限制酶的切割位點如圖1所示，圖中灰色區(qū)域堿基序列是已知的，啟動子P（圖中黑色區(qū)域）及上游堿基序列未知，片段Ⅰ和片段Ⅱ中的字母A～F均表示引物。請回答下列問題。
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（1）啟動子是
RNA聚合酶識別并結合
RNA聚合酶識別并結合
的位點。不能直接根據(jù)片段I擴增啟動子P的原因是
啟動子P及左側的序列未知，無法合成PCR所需要的引物
啟動子P及左側的序列未知，無法合成PCR所需要的引物
。
（2）為了能擴增正常啟動子P，科研人員先用
酶1和DNA連接
酶1和DNA連接
酶處理圖中的片段Ⅰ，使片段Ⅰ成為環(huán)狀DNA；再將環(huán)狀DNA用
酶2
酶2
（填“酶1”或“酶2”）處理得到了片段Ⅱ，如圖2所示。根據(jù)片段Ⅱ能不能擴增出啟動子P？若能，請寫出可選用的引物組合（用C、D、E、F表示），若不能請說明理由
能，可選用的引物組合是D和E
能，可選用的引物組合是D和E
。
（3）已知卡那霉素可抑制煙草細胞的生長，基因M可在煙草的根部正常表達，其表達產(chǎn)物可將X-Gluc水解生成藍色物質。將啟動子P和基因M結合并與含有卡那霉素抗性基因的Ti-質粒重組構建基因表達載體。將表達載體和酚類物質混合后加入含有煙草細胞的培養(yǎng)基中，酚類物質的作用是
吸引農桿菌感染煙草細胞
吸引農桿菌感染煙草細胞
。再用含有
卡那霉素和X?Gluc
卡那霉素和X?Gluc
的培養(yǎng)基篩選出所需的煙草細胞，然后經(jīng)過植物組織培養(yǎng)獲得轉基因煙草植株。

【答案】RNA聚合酶識別并結合；啟動子P及左側的序列未知，無法合成PCR所需要的引物；酶1和DNA連接；酶2；能，可選用的引物組合是D和E；吸引農桿菌感染煙草細胞；卡那霉素和X?Gluc
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：1難度：0.5
相似題

  • 1．利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示，下列敘述不正確的是（　?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/201711/197/1bd70dc0.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布：2024/10/28 21:30:2組卷：25引用：2難度：0.7

  • 2．科學家對乳酸脫氫酶（LDH）進行了改造，使其能夠高效地生產(chǎn)高純度的苯乳酸。回答下列有關問題：
    （1科學家改造乳酸脫氫酶時需要做的第一步是
     
    。研究發(fā)現(xiàn)，要將LDH基因改造成為mLDH（改造后的乳酸脫氫酶）基因，需將LDH第52位的酪氨酸替換為亮氨酸，使得活性中心增大，才能用于生產(chǎn)苯乳酸。
    ①先將LDH基因片段連人載體中，形成環(huán)狀質粒（如圖1）。
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    將突變后的序列設計在引物1中，以環(huán)狀質粒為PCR的
     
    ，再向體系中加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、
     
    ，以及堿基替換了的引物擴增LDH基因，PCR產(chǎn)物的序列便引入了預期的突變。
    ②上述PCR產(chǎn)物為鏈狀DNA分子，改造后的LDH基因序列位于PCR產(chǎn)物的兩側，需要用
     
    酶將產(chǎn)物兩端連接，獲得含有mLDH基因的質粒。
    （2）產(chǎn)生苯乳酸的過程還需FDH酶參與?，F(xiàn)需要構建同時含有mLDH、FDH的基因表達載體。請你根據(jù)圖2，提出將兩個基因依次連入載體的思路：
     
    （要體現(xiàn)選用的內切酶和連接的先后順序）。
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    （3）上述科學實踐屬于生物工程中的
     
    工程。在生命科學高速發(fā)展的今天，基因改造已十分成熟，但有一些紅線不能觸碰，請你舉出一例我國明令禁止的生物工程應用：
     
    。

    發(fā)布：2024/10/28 17:0:2組卷：9引用：2難度：0.6

  • 3．我國科學家將人類的生長激素（GH）基因導入鯉魚的受精卵，培育出能快速生長的轉基因鯉魚。下列敘述錯誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/10/28 17:0:2組卷：9引用：2難度：0.7
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