新冠病毒為單股正鏈RNA病毒,其主要表面抗原為S蛋白,由S基因控制合成。到目前為止,我國已有5款新冠病毒疫苗獲批使用。5款疫苗按技術路徑分為三類:滅活疫苗(Vero細胞)、重組新型冠狀病毒疫苗(CHO細胞)和腺病毒載體疫苗。回答下列問題:
(1)以新冠病毒的RNA為模板,通過RT-PCR獲取S基因(DNA)時需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶。在RT-PCR過程中,引物的作用是界定要擴增的目的基因;是逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶的結合部位;是子鏈延伸的起點界定要擴增的目的基因;是逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶的結合部位;是子鏈延伸的起點。
(2)Vero細胞為非洲綠猴腎細胞的傳代細胞系細胞,將新冠病毒接種到Vero細胞,經(jīng)培養(yǎng)、滅活后可制成新冠病毒滅活疫苗。Vero細胞的培養(yǎng)應培養(yǎng)箱中進行,培養(yǎng)箱的氣體環(huán)境為5%CO2、95%空氣5%CO2、95%空氣,為利于Vero細胞生長,培養(yǎng)基中一般添加血清血清。
(3)CHO細胞是中國倉鼠卵巢的細胞系細胞。CHO-GS是人工敲除了谷氨酰胺合成酶基因(GS基因)的CHO細胞,該細胞在不含甲硫氨酸硫氧胺(MSX)的培養(yǎng)基上不能生活。將S基因、GS基因S基因、GS基因構建于質(zhì)粒上并導入CHO-GS細胞后,該細胞可在不含MSX的培養(yǎng)基上生活,并產(chǎn)生S蛋白。
(4)腺病毒是DNA病毒,位于兩ITR間的基因可以表達。其中,E1區(qū)控制合成的E1蛋白能啟動基因組的復制。用腺病毒作載體,研制腺病毒新冠疫苗的技術路徑如圖所示。人工改造腺病毒DNA時,科研人員刪除了E1區(qū)。刪除E1區(qū)的好處是限制腺病毒DNA 的復制,提高安全性;增大對目的基因的載量限制腺病毒DNA 的復制,提高安全性;增大對目的基因的載量。重組S基因腺病毒在人胚胎腎細胞中不能完成復制,但在基因工程改造過的人胚胎腎細胞(細胞系293)中卻能大量增殖,推測“基因工程改造”應是將E1基因?qū)肴伺咛ツI細胞將E1基因?qū)肴伺咛ツI細胞。
(5)新冠滅活疫苗采取2針免疫,重組新型冠狀病毒疫苗采取3針免疫。多針免疫的目的是提高人體中記憶細胞數(shù)量和新冠抗體濃度提高人體中記憶細胞數(shù)量和新冠抗體濃度。
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶;界定要擴增的目的基因;是逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶的結合部位;是子鏈延伸的起點;5%CO2、95%空氣;血清;S基因、GS基因;限制腺病毒DNA 的復制,提高安全性;增大對目的基因的載量;將E1基因?qū)肴伺咛ツI細胞;提高人體中記憶細胞數(shù)量和新冠抗體濃度
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:41引用:1難度:0.6
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1.雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結構如圖所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的DNA子鏈中后,子鏈的延伸立即終止。現(xiàn)通過PCR技術獲得被標記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關的酶和相應的緩沖液等,還需加入的原料是( ?。?br />
①dCTP,dGTP,dATP
②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
③α位被32P標記的ddTTP
④γ位被32P標記的ddTTP發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:27引用:1難度:0.6 -
2.通過設計引物,運用PCR技術可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程,其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對,但不影響引物與模板鏈的整體配對,反應體系中引物1和引物2的5′端分別設計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/11/19 10:30:1組卷:115引用:5難度:0.7 -
3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/11/22 4:0:1組卷:21引用:2難度:0.6
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