磷酸吡哆醛（PLP）是維生素B6的活性形式，是多種酶的重要輔酶。科研人員從大腸桿菌（E?coliK12）中找到了合成PLP的關(guān)鍵酶A，通過(guò)基因工程構(gòu)建了高產(chǎn)PLP的工程菌，流程如圖所示，IPTG可誘導(dǎo)lacI啟動(dòng)酶A基因表達(dá)?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）在基因工程中，①過(guò)程得到的酶A基因稱為 目的基因目的基因。PCR技術(shù)擴(kuò)增酶A基因過(guò)程中，變性的目的是 使酶A基因DNA雙鏈解為單鏈使酶A基因DNA雙鏈解為單鏈。
（2）在構(gòu)建pETDuet-1-A表達(dá)載體過(guò)程中，酶A基因與質(zhì)粒在DNA連接酶的作用下通過(guò) 磷酸二酯磷酸二酯鍵連接起來(lái)。③過(guò)程常用Ca2+處理，并在一定溫度下促進(jìn)E?coliBL21吸收表達(dá)載體從而完成 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化過(guò)程。
（3）③過(guò)程后將工程菌先置于含 氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基中篩選出能夠生長(zhǎng)的菌落，再做進(jìn)一步篩選即可得到所需菌落。為驗(yàn)證④過(guò)程得到的是否為高產(chǎn)PLP工程菌，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路：將原始E?coliBL21菌株與重組菌株分別在含有適量IPTG的培養(yǎng)液中適宜條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)培養(yǎng)液中PLP的含量將原始E?coliBL21菌株與重組菌株分別在含有適量IPTG的培養(yǎng)液中適宜條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)培養(yǎng)液中PLP的含量。
（4）研究表明，當(dāng)IPTG濃度過(guò)高時(shí)，PLP產(chǎn)量反而下降，其原因可能是 IPTG濃度過(guò)高會(huì)抑制工程菌的生長(zhǎng)IPTG濃度過(guò)高會(huì)抑制工程菌的生長(zhǎng)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】目的基因；使酶A基因DNA雙鏈解為單鏈；磷酸二酯；轉(zhuǎn)化；氨芐青霉素；將原始E?coliBL21菌株與重組菌株分別在含有適量IPTG的培養(yǎng)液中適宜條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)培養(yǎng)液中PLP的含量；IPTG濃度過(guò)高會(huì)抑制工程菌的生長(zhǎng)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：1引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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