紫杉醇是紅豆杉產(chǎn)生的一種重要抗癌物質(zhì)，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得紫杉醇的基本過(guò)程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）外植體經(jīng)

脫分化

脫分化

過(guò)程形成愈傷組織。用纖維素酶和果膠酶對(duì)愈傷組織進(jìn)行處理的目的是

將愈傷組織分散成單細(xì)胞

將愈傷組織分散成單細(xì)胞

。該植物組織培養(yǎng)過(guò)程屬于

C

C

（A．器官發(fā)生途徑　B．體細(xì)胞胚發(fā)生途徑　C．都不是）。
（2）將誘導(dǎo)出的愈傷組織接種至裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中振蕩培養(yǎng)，影響細(xì)胞的生長(zhǎng)速度和紫杉醇含量的因素有

培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比、細(xì)胞遺傳特性、振蕩速度等

培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比、細(xì)胞遺傳特性、振蕩速度等

等（答出兩點(diǎn)）。
（3）如要將外源基因?qū)爰t豆杉細(xì)胞進(jìn)行遺傳改造，圖1表示構(gòu)建重組DNA的過(guò)程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr）和氨芐青霉素抗性基因（ampr），回答下列問(wèn)題：

①圖中酶1和酶3分別是

限制（性內(nèi)切核酸）酶、DNA連接酶

限制（性內(nèi)切核酸）酶、DNA連接酶

；
②為篩選出含重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到甲、乙、丙三類菌落，三類菌落形態(tài)相同，生長(zhǎng)情況如圖2所示，應(yīng)選擇的菌落類型是

B

B

類，未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒的菌落類型是

A

A

類；（填字母類型）


③為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。甲、乙、丙3條引物（圖中→表示復(fù)制方向）在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置如圖3所示，PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是

乙和丙

乙和丙

，某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段，原因是

目的基因反向連接

目的基因反向連接

。