地塞米松(DEX)作為抗炎藥用于臨床治療已有多年歷史,但卻會(huì)引起很多副作用。長(zhǎng)期服用DEX會(huì)引發(fā)糖尿病,研究人員就此機(jī)制進(jìn)行了研究。
(1)DEX是糖皮質(zhì)激素類藥物。腎上腺分泌的糖皮質(zhì)激素通過 體液體液運(yùn)輸作用于靶細(xì)胞,調(diào)控相關(guān)基因表達(dá),參與血糖調(diào)節(jié),還具有免疫抑制作用。
(2)用DEX和RU486(糖皮質(zhì)激素受體拮抗劑)處理小鼠,提取肝細(xì)胞RNA進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果如圖1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 DEX與糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合后,促進(jìn)了K基因的轉(zhuǎn)錄DEX與糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合后,促進(jìn)了K基因的轉(zhuǎn)錄。
(3)用DEX處理小鼠和體外培養(yǎng)的小鼠肝細(xì)胞,均檢測(cè)到肝細(xì)胞糖異生(非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖的過程)關(guān)鍵基因P轉(zhuǎn)錄水平提高。為研究K蛋白調(diào)控P基因轉(zhuǎn)錄的作用位點(diǎn),獲取了P基因-729~+82bp區(qū)域的不同片段以及突變片段,將其連接到熒光素酶基因(Luc)上游并轉(zhuǎn)入高表達(dá)K基因的細(xì)胞系中,檢測(cè)熒光強(qiáng)度,結(jié)果如圖2。由圖2結(jié)果推測(cè),K蛋白結(jié)合在P基因的-174~+82bp區(qū)域,依據(jù)是 前三組均含有-174~+82bp區(qū)域,在K蛋白作用下熒光強(qiáng)度基本一致。第4組-174~+82bp區(qū)域發(fā)生突變后,熒光強(qiáng)度顯著低于前三組前三組均含有-174~+82bp區(qū)域,在K蛋白作用下熒光強(qiáng)度基本一致。第4組-174~+82bp區(qū)域發(fā)生突變后,熒光強(qiáng)度顯著低于前三組。
(4)分離(2)中小鼠肝臟細(xì)胞核物質(zhì),用超聲波破碎DNA(與蛋白質(zhì)結(jié)合區(qū)不易被超聲波破碎),分別加入抗K抗體(A)和無關(guān)抗體(B),進(jìn)行免疫沉淀實(shí)驗(yàn)。以沉淀下來的DNA為模板,根據(jù)P基因-729~-174、-174~+82bp區(qū)域序列分別設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR,電泳結(jié)果支持(3)的結(jié)論。請(qǐng)?jiān)趫D3中補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(5)綜合上述研究,推測(cè)長(zhǎng)期服用DEX引發(fā)糖尿病的分子機(jī)制。
【考點(diǎn)】血糖平衡調(diào)節(jié);DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】體液;DEX與糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合后,促進(jìn)了K基因的轉(zhuǎn)錄;前三組均含有-174~+82bp區(qū)域,在K蛋白作用下熒光強(qiáng)度基本一致。第4組-174~+82bp區(qū)域發(fā)生突變后,熒光強(qiáng)度顯著低于前三組
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:54引用:1難度:0.6
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