當(dāng)前位置： 2023年福建省寧德市高考生物質(zhì)檢試卷（5月份）> 試題詳情

透明顫菌血紅蛋白基因vgb表達(dá)產(chǎn)物VHb蛋白能使其在低氧的環(huán)境中生長(zhǎng)良好。頂頭孢霉是好氧性真菌，其發(fā)酵產(chǎn)物頭孢菌素C有很大的市場(chǎng)需求量，但低氧環(huán)境影響其產(chǎn)量，傳統(tǒng)發(fā)酵生產(chǎn)的增氧成本高。為提高產(chǎn)量科研人員將透明顫菌血紅蛋白基因vgb基因和頂頭孢霉pcpC啟動(dòng)子進(jìn)行PCR拼接，并與質(zhì)粒1構(gòu)建重組質(zhì)粒，如圖。

注：hph是潮霉素抗性基因，Vgb基因與hph基因共用終止子。
回答下列問題：
（1）PCR過程需要設(shè)計(jì)引物，引物的作用是
使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸
。
（2）據(jù)圖所示，重疊延伸PCR拼接時(shí)，若啟動(dòng)子啟動(dòng)方向與引物3延伸方向一致，引物2和引物3的5′端需分別添加
XbaⅠ、BamⅠ
XbaⅠ、BamⅠ
序列。拼接形成重組基因的目的是
使頂頭孢霉在低氧的環(huán)境中生長(zhǎng)良好，提高其發(fā)酵產(chǎn)物頭孢菌素C的產(chǎn)量
使頂頭孢霉在低氧的環(huán)境中生長(zhǎng)良好，提高其發(fā)酵產(chǎn)物頭孢菌素C的產(chǎn)量
。
（3）利用含有
潮霉素
潮霉素
的選擇培養(yǎng)基篩選菌種，最后從個(gè)體生物學(xué)水平上鑒定，若
在低氧環(huán)境下，檢測(cè)到頭孢菌素C表達(dá)量增多
在低氧環(huán)境下，檢測(cè)到頭孢菌素C表達(dá)量增多
，則表示轉(zhuǎn)化成功。
（4）為驗(yàn)證轉(zhuǎn)化成功的重組菌株遺傳穩(wěn)定性，可將菌株在
不含
不含
（含/不含）潮霉素的液體培養(yǎng)基中連續(xù)轉(zhuǎn)接10代，取第10代菌液采用
稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
法接種到
含
含
（含/不含）潮霉素的固體培養(yǎng)基上，若能在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，表明重組菌株遺傳穩(wěn)定性良好。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．

【答案】使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸；XbaⅠ、BamⅠ；使頂頭孢霉在低氧的環(huán)境中生長(zhǎng)良好，提高其發(fā)酵產(chǎn)物頭孢菌素C的產(chǎn)量；潮霉素；在低氧環(huán)境下，檢測(cè)到頭孢菌素C表達(dá)量增多；不含；稀釋涂布平板法；含

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/5/12 8:0:9組卷：31引用：2難度：0.6

相似題

1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　　）

A．可以將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞

B．實(shí)驗(yàn)過程中采用顯微注射的方法導(dǎo)入目的基因

C．檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄的方法是抗原-抗體雜交

D．目的基因只存在于動(dòng)物的乳腺細(xì)胞中

發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：5引用：1難度：0.9

解析

2．最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并將其分泌到尿液中．這是繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展．
（1）將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞，常用的方法是

．所使用到儀器是

．
（2）在基因工程中，將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí)，必須用

酶和

酶．常用的運(yùn)載體有

、

、

等，而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件，例如應(yīng)具有

以便進(jìn)行篩選．進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物的

中，原因是

．
（3）通常采用

技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組中．
（4）在研究膀胱生物反應(yīng)器時(shí)，應(yīng)使外源基因在小鼠的

細(xì)胞中特異性表達(dá)．
（5）如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于

．
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：3引用：1難度：0.3
解析
3．抗凝血酶是一種天然抗凝血?jiǎng)?，在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶，如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段，回答下列問題：

（1）現(xiàn)有以下4種引物，引物A15'-GGACCCCGGG-3'；引物B：5'-CATTTCTAGA-3'；引物C：5'-CCTGGGGCCC-3'；引物D：5'-GTAAAGATCT-3'；，利用PCR擴(kuò)增獲取抗凝血酶基因，應(yīng)選用引物

（填引物名稱），擴(kuò)增產(chǎn)物可選擇限制酶

切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
（2）所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動(dòng)子，其作用是

，將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上，長(zhǎng)出了多個(gè)大腸桿菌菌落，這些菌落并非都是目的菌株，原因是

。
（3）將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒，再通過

方法導(dǎo)入到豬或羊的

細(xì)胞內(nèi)，通過培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：4引用：1難度：0.6
解析

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1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（ ）

1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　　）