2019年7月13日,Inovio制藥公司宣布,該公司的GT-EPIC平臺基于DNA的個性化新生抗原靶向疫苗進(jìn)行了第一位癌癥患者治療。GT-EPIC平臺進(jìn)行的DNA疫苗的研究是繼病原體疫苗和亞單位疫苗之后的第三代疫苗。GT-EPIC平臺的獨(dú)特之處在于,他們沒有創(chuàng)建或制造免疫抗原,將其植入人體,誘導(dǎo)所需的免疫反應(yīng),而是創(chuàng)造了一個DNA片段,它為一個或多個新生抗原編碼,并將DNA放入身體的細(xì)胞中,允許自身的細(xì)胞產(chǎn)生所需的新抗原,激活機(jī)體的免疫系統(tǒng),從而誘導(dǎo)特異性的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答。請回答下列問題:
(1)研制DNA疫苗時需要將抗原決定基因與質(zhì)粒構(gòu)建重組表達(dá)載體,目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用;科研人員用如圖所示的質(zhì)粒為載體,應(yīng)選用BamHⅠ及DNA連接BamHⅠ及DNA連接酶將該質(zhì)粒與抗原決定基因構(gòu)建為重組質(zhì)粒。檢測抗原決定基因是否成功表達(dá)的方法是抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交。
(2)獲取抗原決定基因時,通常是在腫瘤病變細(xì)胞內(nèi)提取mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄酶的作用獲取cDNAcDNA用于PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增時同時需要設(shè)計兩兩種引物,原因是DNA是兩條反向平行的雙鏈結(jié)構(gòu),DNA聚合酶只能從3’延伸子鏈,用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時被擴(kuò)增DNA是兩條反向平行的雙鏈結(jié)構(gòu),DNA聚合酶只能從3’延伸子鏈,用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時被擴(kuò)增。
(3)DNA疫苗所利用的DNA編碼序列通常只是單一的一段病原體基因,而非整個基因組,這樣做的優(yōu)點是比較安全,能夠產(chǎn)生相應(yīng)的抗原刺激免疫系統(tǒng),又不會產(chǎn)生完整的病原體造成危害比較安全,能夠產(chǎn)生相應(yīng)的抗原刺激免疫系統(tǒng),又不會產(chǎn)生完整的病原體造成危害。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用;BamHⅠ及DNA連接;抗原-抗體雜交;cDNA;兩;DNA是兩條反向平行的雙鏈結(jié)構(gòu),DNA聚合酶只能從3’延伸子鏈,用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時被擴(kuò)增;比較安全,能夠產(chǎn)生相應(yīng)的抗原刺激免疫系統(tǒng),又不會產(chǎn)生完整的病原體造成危害
【解答】
【點評】
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