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菁優(yōu)網(wǎng)根癌農(nóng)桿菌及其質(zhì)粒是一種天然的植物外源基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)。實驗小組利用根癌農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒系統(tǒng)將抗菌肽基因?qū)攵i稻細(xì)胞內(nèi),獲得了具有廣泛抗菌效應(yīng)的水稻?;卮鹣铝袉栴}:
(1)轉(zhuǎn)化是基因工程中的一個重要環(huán)節(jié),轉(zhuǎn)化是指目的基因進入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)
維持穩(wěn)定和表達(dá)
維持穩(wěn)定和表達(dá)
的過程。實驗小組在進行含重組質(zhì)粒的根癌農(nóng)桿菌和秈稻組織細(xì)胞共培養(yǎng)前,受體細(xì)胞要沾蘸少量酚類化合物。沾蘸酚類化合物的作用是
吸引根癌農(nóng)桿菌向受體細(xì)胞移動
吸引根癌農(nóng)桿菌向受體細(xì)胞移動
。檢測抗菌肽基因是否插入到受體細(xì)胞的DNA上,可采用
DNA分子雜交
DNA分子雜交
技術(shù)進行檢測。
(2)如圖表示經(jīng)人工修飾后的Ti質(zhì)粒。
①在構(gòu)建的重組Ti質(zhì)粒中,啟動子應(yīng)該位于抗菌肽基因的
上游
上游
(填“上游”或“下游”)。
②構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時,要將抗菌肽基因?qū)氲絋-DNA內(nèi)部,原因是
T-DNA能攜帶目的基因轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上
T-DNA能攜帶目的基因轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上
。篩選重組質(zhì)粒時,需要在培養(yǎng)基中加入
新霉素
新霉素
。在該培養(yǎng)基上能增殖的細(xì)胞不能完全保證成功導(dǎo)入了抗菌肽基因,原因可能是
導(dǎo)入了不含抗菌肽基因的空白載體
導(dǎo)入了不含抗菌肽基因的空白載體
,因此需要進一步篩選和鑒定。

【答案】維持穩(wěn)定和表達(dá);吸引根癌農(nóng)桿菌向受體細(xì)胞移動;DNA分子雜交;上游;T-DNA能攜帶目的基因轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上;新霉素;導(dǎo)入了不含抗菌肽基因的空白載體
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.某種結(jié)腸癌細(xì)胞存在抑癌基因A的突變,研究人員準(zhǔn)備利用DNA重組技術(shù)將突變的抑癌基因A克隆到質(zhì)粒載體上,用于后續(xù)癌癥發(fā)生機制和癌癥治療的研究。下列說法正確的是(  )

    發(fā)布:2024/10/28 10:30:1組卷:5引用:2難度:0.7
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展.
    (1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運載體結(jié)合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運載體有
     
    、
     
     
    等,而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進行篩選.進行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細(xì)胞中特異性表達(dá).
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細(xì)胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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