新冠mRNA疫苗是一種全新的疫苗研發(fā)技術,其原理是將編碼抗原蛋白(S 蛋白)的mRNA直接注入人體,進一步翻譯出S蛋白,誘導免疫系統產生免疫應答,而只有蛋白質的病毒是沒有侵染能力的。同時,mRNA在人體使用過后會被分解,不會整合逃人體基因組。回答下列問題:
(1)滅活疫苗是最傳統經典的生產技術,即在體外培養(yǎng)新冠病毒,經過滅活、減毒滅活、減毒處理使其失去致病性,注入人體后可以刺激人體產生抗體和記憶細胞記憶細胞。 其優(yōu)點是制備方法簡單,但滅活可能對病毒抗原有一定影響導致作用效果低,且研發(fā)上市周期較長。
(2)某實驗室快速制備新冠mRNA疫苗的部分過程如下,請分析補充有關內容:
①提取新冠病毒的RNA,利用RT--PCR技術以編碼S蛋白的RNA片段為模板合成cDNA,催化該過程的酶是逆轉錄酶逆轉錄酶。PCR過程需要根據S蛋白基因的已知的部分核苷酸序列S蛋白基因的已知的部分核苷酸序列設計引物。為便于后續(xù)的剪切和連接,應該在2種引物的5'端分別加上兩種不同的限制性酶切位點兩種不同的限制性酶切位點。
②將擴增得到的cDNA與質粒連接構建成重組DNA,再導入大腸桿菌。此過程中通常選用兩種不同的限制酶切割的原因是防止目的基因自連、防止質粒自身環(huán)化、保證目的基因與載體正確連接防止目的基因自連、防止質粒自身環(huán)化、保證目的基因與載體正確連接(至少寫出2條)。
③利用細菌的快速繁殖,經過提取、分離純化等工藝獲得大量由S蛋白的DNA轉錄得到的mRNAmRNA,因其單獨存在時結構不穩(wěn)定,包裹一層脂類最終制成新冠mRNA疫苗。
(3)理論上,與滅活疫苗相比,mRNA疫苗的優(yōu)點是安全性高、效果好、產量高、一般不會產生毒性、研發(fā)速度快、上市周期短、病毒變異容易修改核酸序列安全性高、效果好、產量高、一般不會產生毒性、研發(fā)速度快、上市周期短、病毒變異容易修改核酸序列。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】滅活、減毒;記憶細胞;逆轉錄酶;S蛋白基因的已知的部分核苷酸序列;兩種不同的限制性酶切位點;防止目的基因自連、防止質粒自身環(huán)化、保證目的基因與載體正確連接;mRNA;安全性高、效果好、產量高、一般不會產生毒性、研發(fā)速度快、上市周期短、病毒變異容易修改核酸序列
【解答】
【點評】
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