鎳是一種重金屬，由于在工業(yè)上被大量使用及廢料的大量排放而對環(huán)境產(chǎn)生了嚴重的污染?？蒲腥藛T采用重組DNA技術(shù)構(gòu)建了兩種重組質(zhì)粒，其中重組質(zhì)粒pSUNI含有nixA基因，該基因編碼一種高特異性的Ni2+轉(zhuǎn)運蛋白，重組質(zhì)粒pGPMT3帶有編碼金屬硫蛋白基因（tmG），金屬硫蛋白（TM）可高容量地結(jié)合重金屬離子，又可在細胞內(nèi)消除重金屬離子對細胞本身的毒害作用。科研人員再利用基因工程將兩種目的基因?qū)氲酱竽c桿菌，培育出能夠富集Ni²⁺的“超級細菌”——大腸桿菌JM109，用來凈化工業(yè)廢水，治理環(huán)境污染。回答下列問題：
（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒pSUNI、pGPMT3所需要的兩種酶是

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌JM109細胞之后，nixA基因表達產(chǎn)物分布在大腸桿菌的

細胞膜

細胞膜

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（2）為檢測目的基因是否導(dǎo)入大腸桿菌，可采用PCR技術(shù)對待測大腸桿菌進行檢測，但需先提取其DNA。為充分溶解DNA，將獲得的沉淀物溶于

2mol/LNaCl

2mol/LNaCl

（要求寫出液體名稱及具體濃度）中，再用

瓊脂糖凝膠電泳

瓊脂糖凝膠電泳

（填一種方法）對PCR產(chǎn)物進行鑒定。

（3）為獲得大量的大腸桿菌JM109，科研人員將受體菌分別接種于3個盛有等量同種液體培養(yǎng)基的容器瓶中，并放置在搖床上培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速分別為210r/min,230r/min和250r/min。培養(yǎng)時間與大腸桿菌種群密度的關(guān)系如圖1所示。分析數(shù)據(jù)可以得出結(jié)論：在一定轉(zhuǎn)速范圍內(nèi)，搖床轉(zhuǎn)速越高，

種群密度越大

種群密度越大

，其原因是

搖床轉(zhuǎn)速越高，培養(yǎng)基中O?越充足，與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積越大，大腸桿菌繁殖的速度越快

搖床轉(zhuǎn)速越高，培養(yǎng)基中O?越充足，與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積越大，大腸桿菌繁殖的速度越快

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（4）科研人員為檢測大腸桿菌JM109富集Ni²⁺的效果，在適宜的條件下培養(yǎng)原JM109、JM109+pSUNI、JM109+pSUNI+pGPMT3，在含有一定濃度Ni²⁺的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，檢測大腸桿菌菌體的數(shù)量和菌體中Ni2+的含量，實驗結(jié)果如圖2所示。JM109+pSUNI組的大腸桿菌數(shù)量最少的原因是

特異性的Ni²⁺轉(zhuǎn)運蛋白將較多Ni²⁺轉(zhuǎn)運入細胞，且沒有金屬硫蛋白（TM）消除Ni²⁺對自身細胞的毒害作用

特異性的Ni²⁺轉(zhuǎn)運蛋白將較多Ni²⁺轉(zhuǎn)運入細胞，且沒有金屬硫蛋白（TM）消除Ni²⁺對自身細胞的毒害作用

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