為了將某納米抗體和綠色熒光蛋白基因融合表達，運用重組酶技術構建質(zhì)粒，如圖1所示。請回答下列問題：?
（1）分別進行PCR擴增片段F1與片段F2時，配制的兩個反應體系中不同的有 模板（片段F1、片段F2）、引物模板（片段F1、片段F2）、引物，擴增程序中最主要的不同是 反應時間反應時間。
（2）有關基因序列如圖2。引物F2-F、F1-R應在下列選項中選用 CDCD。
A.ATGGTG-----CAACCA
B.TGGTTG----CACCAT
C.GACGAG---CTGCAG?
D.CTGCAG-----CTCGTC
（3）將PCR產(chǎn)物片段與線性質(zhì)粒載體混合后，在重組酶作用下可形成環(huán)化質(zhì)粒，直接用于轉化細菌。這一過程與傳統(tǒng)重組質(zhì)粒構建過程相比，無需使用的酶主要有 限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶。
（4）轉化后的大腸桿菌需采用含有抗生素的培養(yǎng)基篩選，下列敘述錯誤的有 ABCABC。
A.稀釋涂布平板需控制每個平板30～300個菌落
B.抗性平板上未長出菌落的原因一般是培養(yǎng)基溫度太高
C.抗性平板上常常會出現(xiàn)大量雜菌形成的菌落
D.抗性平板上長出的單菌落無需進一步劃線純化
（5）為了驗證平板上菌落中的質(zhì)粒是否符合設計，用不同菌落的質(zhì)粒為模板，用引物F1-F和F2-R進行了PCR擴增，質(zhì)粒P1～P4的擴增產(chǎn)物電泳結果如圖3。根據(jù)圖中結果判斷，可以舍棄的質(zhì)粒有 P3、P4P3、P4。
（6）對于PCR產(chǎn)物電泳結果符合預期的質(zhì)粒，通常需進一步通過基因測序確認，原因是 瓊脂糖凝膠電泳技術僅能用于分析待檢測DNA分子的大小，無法確定待檢測DNA分子的堿基序列瓊脂糖凝膠電泳技術僅能用于分析待檢測DNA分子的大小，無法確定待檢測DNA分子的堿基序列。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】模板（片段F1、片段F2）、引物；反應時間；CD；限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）和DNA連接酶；ABC；P3、P4；瓊脂糖凝膠電泳技術僅能用于分析待檢測DNA分子的大小，無法確定待檢測DNA分子的堿基序列
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/12 8:0:9組卷：223引用：1難度：0.4
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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