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基因定點整合可替換特定基因，該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的，將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因，可用來研究該病的治療過程。定點整合的過程是：從染色體DNA的突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2，根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2，再將兩者分別與基因K1、K2連接，中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因neor，構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換，導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換，如圖所示。回答下列問題：
菁優(yōu)網(wǎng)
（1）構(gòu)建重組載體，常用的工具酶有
限制酶、DNA連接酶
限制酶、DNA連接酶
。構(gòu)建重組載體時，需要大量PKU基因，常用
PCR
PCR
技術(shù)合成PKU基因，利用該方法合成PKU基因時需要設(shè)計并合成
2
2
種引物。
（2）題干中所用胚胎干細胞可以來自
早期胚胎或原始性腺
早期胚胎或原始性腺
。培養(yǎng)過程中大部分細胞會貼附在培養(yǎng)瓶壁生長，當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂，這種現(xiàn)象稱為
接觸抑制
接觸抑制
。
（3）實驗過程中，為了提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割技術(shù)，若選用囊胚期的胚胎，操作過程中要特別注意將內(nèi)細胞團均等分割，原因是
保證分割后的每一個胚胎的恢復(fù)和正常發(fā)育
保證分割后的每一個胚胎的恢復(fù)和正常發(fā)育
。
（4）用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細胞時，會出現(xiàn)PKU基因錯誤整合。錯誤整合時，載體的兩個K基因中至少會有一個與neor一起整合到染色體DNA上。已知含有neor的細胞具有G418的抗性。Kl、K2的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細胞死亡。轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞依次在含有G418及同時含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，在雙重選擇下存活下來的是
正確整合
正確整合
（填“正確整合”或“錯誤整合”）的胚胎干細胞，理由是
能在含有G418的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞中含有neor，能在同時含G418和DHPG的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞中含有neor且不含K基因
能在含有G418的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞中含有neor，能在同時含G418和DHPG的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞中含有neor且不含K基因
。

【答案】限制酶、DNA連接酶；PCR；2；早期胚胎或原始性腺；接觸抑制；保證分割后的每一個胚胎的恢復(fù)和正常發(fā)育；正確整合；能在含有G418的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞中含有neor，能在同時含G418和DHPG的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細胞中含有neor且不含K基因
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：38引用：4難度：0.7
相似題

  • 1．tPA是一種臨床上用于治療心腦血栓類疾病的藥物，科研人員計劃用動物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)tPA，但tPA并不是乳腺蛋白，因此在動物乳腺中的表達水平較低。生長激素（GH）可促進動物細胞增殖和乳腺生長發(fā)育及維持泌乳。研究人員通過構(gòu)建具有GH基因和tPA基因的雙轉(zhuǎn)基因小鼠（過程如圖），探究GH基因是否能促進外源目的基因tPA表達水平的提高。下列敘述中錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：3引用：2難度：0.6

  • 2．基因工程被廣泛應(yīng)用于藥物制備、動植物育種等，下圖所示為基因工程在動物乳腺生物反應(yīng)器--轉(zhuǎn)基因山羊和抗蟲棉的培育過程．據(jù)圖回答：
    菁優(yōu)網(wǎng)
    （1）在圖示①過程中，使用的限制酶能夠識別
     
    的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，從而獲得A．也可采用
     
    （填技術(shù)名稱）從人的DNA分子或蘇云金芽孢桿菌中對已知序列的A進行分離并擴增．
    （2）基因工程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一是構(gòu)建B，其完整結(jié)構(gòu)至少包括
     
    等部分，在此過程中除了使用工具酶外，還需使用的工具是
     
    ．
    （3）在通過⑤過程形成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，一般要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，但若在③過程中采用
     
    法則不需要；在形成轉(zhuǎn)基因山羊C的過程中，需要從雌性動物體內(nèi)取出卵，在②過程中通過
     
    將目的基因?qū)?!--BA-->
     
    ，在形成轉(zhuǎn)基因山羊的過程中除了基因工程技術(shù)外，還需要用到
     
    技術(shù)．
    （4）由于轉(zhuǎn)基因表達產(chǎn)物存在于山羊的乳汁中，檢測其體內(nèi)是否出現(xiàn)藥用蛋白，在分子水平上的檢測方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用
     
    ，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．

    發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：7引用：1難度：0.5

  • 3．閱讀下面的材料，完成問題。
    利用基因工程對動植物的遺傳物質(zhì)進行改造，可制作動植物生物反應(yīng)器，在藥物蛋白，疫苗等的生產(chǎn)上有著廣泛的應(yīng)用，我國在這方面也取得重大進展
    材料一：動物生物反應(yīng)器的研究開發(fā)重點是動物乳腺反應(yīng)器和動物血液反應(yīng)器。我國“動物乳腺生物反應(yīng)器”研究取得重要成果，7只含有人生長激素基因的兔子在深圳培育成功，還有一批已接受轉(zhuǎn)基因胚胎移植的牛和羊等待最后檢測。
    材料二：我國對植物生物反應(yīng)器研究的成果有：
    成果1將乙型肝炎病毒包膜的蛋白基因?qū)腭R鈴薯和番茄中，獲得了高效表達該外源基因的工程植株。
    成果2已將產(chǎn)毒素大腸桿菌熱敏毒素b亞基及定居因子CS6B抗原蛋白基因?qū)腭R鈴薯中，獲得了高效表達重組抗原蛋白的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株。
    成果3已成功地在煙草葉片中大量表達出與TMV外殼蛋白融合的多個口蹄疫病毒表面抗原小肽，并成功從煙草葉肉細胞中提取了該物質(zhì)。
    成果4建立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的胡蘿卜轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，已在胡蘿卜中表達出了霍亂毒素b亞單位（CTB）。
    下列關(guān)于動植物生物反應(yīng)器的描述正確的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：5引用：0難度：0.7
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