棉花是重要的經(jīng)濟(jì)作物,近年來(lái)由于蟲害頻發(fā)導(dǎo)致減產(chǎn)嚴(yán)重。研究人員將某細(xì)菌的抗蟲基因C轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞內(nèi),成功獲得了抗蟲轉(zhuǎn)基因棉花。在一定程度上減少了殺蟲劑的使用,減少了環(huán)境污染,提高了作物的產(chǎn)量和質(zhì)量。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)提取某細(xì)菌總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄 過(guò)程獲得總cDNA;利用PCR技術(shù)選擇性擴(kuò)增C基因的cDNA,擴(kuò)增過(guò)程需要用到Taq(熱穩(wěn)定DNA聚合)Taq(熱穩(wěn)定DNA聚合) 酶。
(2)與細(xì)菌中的C基因相比,從cDNA文庫(kù)中獲取的抗蟲基因C不具有啟動(dòng)子、終止子啟動(dòng)子、終止子等調(diào)控基因表達(dá)的組件。
(3)將C基因的cDNA插入到Ti質(zhì)粒的T-DNAT-DNA 上構(gòu)建重組載體,利用農(nóng)桿菌侵染棉花細(xì)胞并將C基因的cDNA整合到棉花細(xì)胞染色體上。為了便于轉(zhuǎn)基因植物的篩選,重組Ti質(zhì)粒中必需包括標(biāo)記基因標(biāo)記基因。
(4)為培育出抗蟲轉(zhuǎn)基因棉花植株,應(yīng)將含有C基因的棉花體細(xì)胞含有C基因的棉花體細(xì)胞接種到適宜培養(yǎng)基上。這個(gè)細(xì)胞先經(jīng)過(guò)脫分化脫分化形成愈傷組織,再分化形成胚狀體,并逐漸發(fā)育成完整植物體。
(5)由于科學(xué)發(fā)展水平的限制,目前對(duì)基因的結(jié)構(gòu)、基因間的相互作用基因的結(jié)構(gòu)、基因間的相互作用及基因的調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限。因此,在將轉(zhuǎn)基因棉花應(yīng)用于商業(yè)化生產(chǎn)之前,必須對(duì)其進(jìn)行安全性評(píng)估。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;Taq(熱穩(wěn)定DNA聚合);啟動(dòng)子、終止子;T-DNA;標(biāo)記基因;含有C基因的棉花體細(xì)胞;脫分化;基因的結(jié)構(gòu)、基因間的相互作用
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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