科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出超量表達P蛋白的轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達P基因載體的構(gòu)建中，含P基因的DNA片段以及Ti質(zhì)粒的酶切位點如圖所示，其中強啟動子能驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。請回答下列問題。
（1）以RNA為模板，通過RT-PCR技術(shù)可獲取P基因。進行RT-PCR時一般要加入4種脫氧核糖核苷三磷酸（dNTP）而不是脫氧核苷酸，其原因是 dNTP能為子鏈延伸過程提供能量和原料dNTP能為子鏈延伸過程提供能量和原料，同時需加入的酶有了特異性擴增P基因序列，需根據(jù) P基因兩端的堿基序列P基因兩端的堿基序列設(shè)計特異性引物。
（2）在構(gòu)建基因表達載體時，應(yīng)優(yōu)先選用的限制酶是 BamHIBamHI和 SacISacI這樣操作不僅使P基因在玉米植株中超量表達，還可利用T-DNA的 可轉(zhuǎn)移可轉(zhuǎn)移特性，最終使P基因 整合到玉米細胞染色體上整合到玉米細胞染色體上。
（3）對轉(zhuǎn)基因再生玉米植株進行鑒定時發(fā)現(xiàn)，有些植株雖有P基因，但幾乎沒有P蛋白，造成該現(xiàn)象的原因可能有 基因轉(zhuǎn)化過程中強啟動子可能丟失或斷裂，未能真正轉(zhuǎn)化成功；雖然轉(zhuǎn)化成功，但是P基因保持沉默，不能有效表達基因轉(zhuǎn)化過程中強啟動子可能丟失或斷裂，未能真正轉(zhuǎn)化成功；雖然轉(zhuǎn)化成功，但是P基因保持沉默，不能有效表達。
| 限制酶 | 識別序列 |
| ClaⅠ | 5′-AT↓CGAT-3′ |
| BamHⅠ | 5′-G↓GATCC-3′ |
| HindⅢ | 5′-A↓AGCTT-3′ |
| EcoRⅠ | 5′-G↓AATTC-3′ |
| KpnⅠ | 5′-GGTAC↓C-3′ |
| SacⅠ | 5′-GAGCT↓C-3′ |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】dNTP能為子鏈延伸過程提供能量和原料；P基因兩端的堿基序列；BamHI；SacI；可轉(zhuǎn)移；整合到玉米細胞染色體上；基因轉(zhuǎn)化過程中強啟動子可能丟失或斷裂，未能真正轉(zhuǎn)化成功；雖然轉(zhuǎn)化成功，但是P基因保持沉默，不能有效表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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