URA3是酵母菌Ⅴ號染色體上的一個基因，能編碼相關酶參與酵母菌RNA嘧啶核苷酸的合成。實驗人員利用甲基磺酸乙酯（EMS）對酵母菌進行誘變處理，獲得酵母菌尿嘧啶營養(yǎng)缺陷株，并對其進行了篩選?；卮鹣铝袉栴}：
（1）實驗小組為了檢測EMS誘變的致死率，將酵母菌液離心后收集細胞，再將懸浮細胞置于加入EMS的無菌磷酸緩沖液中，對照組的處理為 將等量懸浮細胞置于等量不含EM的無菌磷酸緩沖液中將等量懸浮細胞置于等量不含EM的無菌磷酸緩沖液中，一段時間后利用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法將菌液接種到平板上，并統(tǒng)計對照組和誘變組的菌落數(shù)，EMS誘變的致死率的公式可表示為 致死率=（對照組菌落數(shù)﹣誘變組菌落數(shù)）÷對照組菌落數(shù)×100%致死率=（對照組菌落數(shù)﹣誘變組菌落數(shù)）÷對照組菌落數(shù)×100%。
（2）為了篩選尿嘧啶缺陷酵母菌，實驗小組將完全培養(yǎng)基中的誘變組菌落用無菌牙簽分別在尿嘧啶缺陷型極限培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基中進行點接，前后位置及編號一一對應，兩培養(yǎng)基的菌落情況如圖所示，則圖中編號為 b和cb和c的菌株為尿嘧啶缺陷酵母菌，判斷理由是 b、c菌株在完全培養(yǎng)基上能繁殖但是不能在尿嘧啶缺陷型極限培養(yǎng)基上繁殖b、c菌株在完全培養(yǎng)基上能繁殖但是不能在尿嘧啶缺陷型極限培養(yǎng)基上繁殖。
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（3）現(xiàn)有多株尿嘧啶缺陷型酵母菌、含有URA3基因的重組載體YE等材料，試設計實驗驗證這些菌株為尿嘧啶缺陷型菌株：將尿嘧啶缺陷型酵母菌隨機均分為甲，乙兩組，將含有URA3基因的重組載體YE導入甲組菌株，將不含URA3基因的載體導入乙組菌株；結果發(fā)現(xiàn)甲組菌株能在尿嘧啶缺陷培養(yǎng)基上繁殖，乙組菌株不能在尿嘧啶缺陷培養(yǎng)基上繁殖，說明這些菌株為尿嘧啶缺陷型菌株將尿嘧啶缺陷型酵母菌隨機均分為甲，乙兩組，將含有URA3基因的重組載體YE導入甲組菌株，將不含URA3基因的載體導入乙組菌株；結果發(fā)現(xiàn)甲組菌株能在尿嘧啶缺陷培養(yǎng)基上繁殖，乙組菌株不能在尿嘧啶缺陷培養(yǎng)基上繁殖，說明這些菌株為尿嘧啶缺陷型菌株。重組載體YE中的URA3基因可起到標記基因的作用.標記基因在基因工程中的作用是 用于重組質粒的篩選和鑒定用于重組質粒的篩選和鑒定。
【答案】將等量懸浮細胞置于等量不含EM的無菌磷酸緩沖液中；稀釋涂布平板；致死率=（對照組菌落數(shù)﹣誘變組菌落數(shù)）÷對照組菌落數(shù)×100%；b和c；b、c菌株在完全培養(yǎng)基上能繁殖但是不能在尿嘧啶缺陷型極限培養(yǎng)基上繁殖；將尿嘧啶缺陷型酵母菌隨機均分為甲，乙兩組，將含有URA3基因的重組載體YE導入甲組菌株，將不含URA3基因的載體導入乙組菌株；結果發(fā)現(xiàn)甲組菌株能在尿嘧啶缺陷培養(yǎng)基上繁殖，乙組菌株不能在尿嘧啶缺陷培養(yǎng)基上繁殖，說明這些菌株為尿嘧啶缺陷型菌株；用于重組質粒的篩選和鑒定
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：7引用：1難度：0.6