人的血清蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價值，研究人員欲用乳腺生物反應器來大量生產(chǎn)HSA。如圖所示為HSA基因片段和人工構建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭頭表示切割形成末端完全不同的4種限制酶的切割位點。請據(jù)圖1回答問題：
（1）人工構建pBR322質(zhì)粒除了含特定限制酶切割位點、標記基因、復制原點外，還必須有 啟動子、終止子啟動子、終止子（答出兩點）等。
（2）若選用牛作為受體動物，可將人血清蛋白基因與 在乳腺中特異表達的基因的啟動子（牛乳腺蛋白基因的啟動子）在乳腺中特異表達的基因的啟動子（牛乳腺蛋白基因的啟動子）等調(diào)控組件重組在一起，通過 顯微注射顯微注射方法將目的基因導入牛的受精卵中，然后使其發(fā)育成轉基因牛。
（3）據(jù)圖分析，在構建基因表達載體時，選擇 EcoRⅠ和PstⅠEcoRⅠ和PstⅠ作為切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和載體的正確連接效率，其原因是 這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接（這兩種酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化和反向連接）這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接（這兩種酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化和反向連接）。
（4）為了排除普通受體細胞（未導入質(zhì)粒）、空質(zhì)粒受體細胞（導入pBR322質(zhì)粒而非重組質(zhì)粒）的干擾，目的基因導入后，進行了進一步篩選：制備甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲培養(yǎng)基含新霉素，乙培養(yǎng)基含新霉素和氨芐青霉素。含重組質(zhì)粒的受體細胞在甲培養(yǎng)基上 能能（填“能”或“不能”）生存，在乙培養(yǎng)基上 不能不能（填“能”或“不能”）生存。
（5）據(jù)如圖2分析，利用PCR技術獲取HSA基因時，應選擇甲、乙、丙、丁四種引物中的 乙、丙乙、丙﹔若擴增4次，共需要引物 3030個。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】啟動子、終止子；在乳腺中特異表達的基因的啟動子（牛乳腺蛋白基因的啟動子）；顯微注射；EcoRⅠ和PstⅠ；這兩種酶能切割質(zhì)粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免質(zhì)粒和目的基因自連及反接（這兩種酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化和反向連接）；能；不能；乙、丙；30
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：3難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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