人的血清蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價值，研究人員欲用乳腺生物反應器來大量生產HSA。如圖所示為HSA基因片段和人工構建的大腸桿菌質粒pBR322，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭頭表示切割形成末端完全不同的4種限制酶的切割位點。請據圖1回答問題：
（1）人工構建pBR322質粒除了含特定限制酶切割位點、標記基因、復制原點外，還必須有 啟動子、終止子啟動子、終止子（答出兩點）等。
（2）若選用牛作為受體動物，可將人血清蛋白基因與 在乳腺中特異表達的基因的啟動子（牛乳腺蛋白基因的啟動子）在乳腺中特異表達的基因的啟動子（牛乳腺蛋白基因的啟動子）等調控組件重組在一起，通過 顯微注射顯微注射方法將目的基因導入牛的受精卵中，然后使其發(fā)育成轉基因牛。
（3）據圖分析，在構建基因表達載體時，選擇 EcoRⅠ和PstⅠEcoRⅠ和PstⅠ作為切割質粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和載體的正確連接效率，其原因是 這兩種酶能切割質粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免質粒和目的基因自連及反接（這兩種酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免質粒和目的基因的自身環(huán)化和反向連接）這兩種酶能切割質粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免質粒和目的基因自連及反接（這兩種酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免質粒和目的基因的自身環(huán)化和反向連接）。
（4）為了排除普通受體細胞（未導入質粒）、空質粒受體細胞（導入pBR322質粒而非重組質粒）的干擾，目的基因導入后，進行了進一步篩選：制備甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲培養(yǎng)基含新霉素，乙培養(yǎng)基含新霉素和氨芐青霉素。含重組質粒的受體細胞在甲培養(yǎng)基上 能能（填“能”或“不能”）生存，在乙培養(yǎng)基上 不能不能（填“能”或“不能”）生存。
（5）據如圖2分析，利用PCR技術獲取HSA基因時，應選擇甲、乙、丙、丁四種引物中的 乙、丙乙、丙﹔若擴增4次，共需要引物 3030個。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】啟動子、終止子；在乳腺中特異表達的基因的啟動子（牛乳腺蛋白基因的啟動子）；顯微注射；EcoRⅠ和PstⅠ；這兩種酶能切割質粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免質粒和目的基因自連及反接（這兩種酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免質粒和目的基因的自身環(huán)化和反向連接）；能；不能；乙、丙；30
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：3難度：0.5
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
相關試卷