生物技術(shù)及生命科學(xué)的應(yīng)用
解脂芽孢桿菌產(chǎn)多種脂肪酶,后者廣泛用于日用化工和食品工業(yè),因此利用生物技術(shù)規(guī)?;a(chǎn)脂肪酶有重要意義。圖1為解脂芽孢桿菌擬核DNA中某分泌型脂肪酶編碼基因(LP)的定位及所用質(zhì)粒DNA的有關(guān)信息,圖中BamHⅠ、EcoRⅠ、MboⅠ均為限制酶。圖2為固定化與非固定化脂肪酶的相對(duì)酶活性與溫度的關(guān)系。
(1)基于上述信息,該項(xiàng)基因工程的目的基因是 某分泌型脂肪酶編碼基因(或LP)某分泌型脂肪酶編碼基因(或LP)。為了與質(zhì)粒DNA合理重組,解脂芽孢桿菌擬核DNA和質(zhì)粒DNA均應(yīng)用限制酶 EcoR1EcoR1切割。
(2)由上述基因工程改造過(guò)的細(xì)菌規(guī)?;a(chǎn)并提純分泌型脂肪酶,需要加入硫酸銨使酶蛋白與其他雜質(zhì)分離,這屬于酶分離提純步驟中的 沉淀沉淀。
(3)為了便于重復(fù)使用,上述制得的脂肪酶往往要固定化。比較圖2的兩條曲線,寫(xiě)出固定化酶的優(yōu)勢(shì)是 固定化酶的活性隨溫度升高而升高,在45-60℃時(shí)酶的固定化活性最高固定化酶的活性隨溫度升高而升高,在45-60℃時(shí)酶的固定化活性最高,劣勢(shì)是 在30-40℃,固定化酶的活性比非固定化酶活性低在30-40℃,固定化酶的活性比非固定化酶活性低。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】某分泌型脂肪酶編碼基因(或LP);EcoR1;沉淀;固定化酶的活性隨溫度升高而升高,在45-60℃時(shí)酶的固定化活性最高;在30-40℃,固定化酶的活性比非固定化酶活性低
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:77引用:1難度:0.7
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