以我國(guó)科學(xué)家為主的科研團(tuán)隊(duì)將OSNL（即4個(gè)基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫(xiě)）導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞（CEFs），誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS），再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞（iPGCs），然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代，實(shí)驗(yàn)流程如圖?；卮鹣铝袉?wèn)題。
（1）CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的，為了獲得單細(xì)胞懸液，雞胚組織剪碎后需用 胰蛋白酶、膠原蛋白酶胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加 動(dòng)物血清動(dòng)物血清等天然成分，以滿足細(xì)胞對(duì)某些細(xì)胞因子的需求。
（2）體外獲取OSNL的方法有 PCR技術(shù)PCR技術(shù)（答出1種即可）。若要在CEFs中表達(dá)外源基因的蛋白，需構(gòu)建基因表達(dá)載體，載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟動(dòng)子和 終止子終止子等。啟動(dòng)子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng) 目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)。
（3）iPS細(xì)胞和iPGCs細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是 基因的選擇性表達(dá)基因的選擇性表達(dá)。
（4）該實(shí)驗(yàn)流程中用到的生物技術(shù)有 基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等（答出1點(diǎn)即可）。
【答案】胰蛋白酶、膠原蛋白酶；動(dòng)物血清；PCR技術(shù)；終止子；RNA聚合酶；目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)；基因的選擇性表達(dá)；基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/25 8:0:9組卷：13引用：5難度：0.7
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1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)是細(xì)胞工程的基本技術(shù)，下列關(guān)于這兩項(xiàng)技術(shù)的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動(dòng)物克隆和胚胎工程有關(guān)的問(wèn)題：
（1）幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動(dòng)物成纖維細(xì)胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加牛血清、以支持生長(zhǎng)等措施。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)卡氏瓶中的細(xì)胞濃度不再增加時(shí)，若要細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是
A．在動(dòng)物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數(shù)排卵
B．若在囊胚期進(jìn)行胚胎分割，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，滋養(yǎng)成則不必
C．可以從雌性動(dòng)物體內(nèi)卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)成熟
D．胚胎成纖維細(xì)胞可以用于胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)，因?yàn)槠淠芊置谝种萍?xì)胞分化的物質(zhì)。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7 -
3．據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟最新數(shù)據(jù)，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬(wàn)成人因糖尿病或其并發(fā)癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）從患者體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱為。一般來(lái)說(shuō)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要的條件有（少答出兩點(diǎn)）。
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學(xué)家將胰島素β鏈的第28和29個(gè)氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素，需要對(duì)進(jìn)行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測(cè)胰島類似細(xì)胞是否具有胰島B細(xì)胞的正常生理功能，可設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)：將等量的胰島類似細(xì)胞與正常胰島B細(xì)胞分別加入兩組相等濃度的培養(yǎng)液中，適宜且相同條件下進(jìn)行培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)兩組培養(yǎng)液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優(yōu)點(diǎn)是。發(fā)布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6
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