豬源大腸桿菌會引起仔豬發(fā)生腸炎、腸毒血癥等疾病。LTB和ST1是豬源大腸桿菌腸毒素基因，融合基因LTB-ST1的表達產(chǎn)物LTB-ST1融合蛋白可有效預(yù)防仔豬黃痢。構(gòu)建融合基因的方法如圖1所示。請回答：
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（1）豬源大腸桿菌與豬細胞在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是 無以核膜為界限的細胞核無以核膜為界限的細胞核，豬源大腸桿菌與豬的種間關(guān)系為 寄生寄生。
（2）在對LTB基因與ST1基因進行PCR過程中，DNA解旋的方法是 高溫高溫，若引物中C或G的堿基數(shù)量越高，則復(fù)性的溫度會 升高升高（選填“升高”、“降低”或“不變”）。
（3）圖1中限制酶1使得LTB基因中的 磷酸二酯磷酸二酯鍵斷裂。為保證經(jīng)酶處理后的LTB基因與ST1基因能夠正常連接，限制酶1與限制酶2在選取時需滿足 以形成相同的黏性末端以形成相同的黏性末端的特點，可見這種融合基因的方法具有局限性。
（4）為突破限制酶選取的局限性，研究人員通過重組PCR技術(shù)構(gòu)建了LTB-ST1融合基因，如圖2所示，請回答：
①重組PCR技術(shù)依據(jù)的生物學原理是 DNA（半保留）復(fù)制DNA（半保留）復(fù)制。PCR1和PCR2需要在兩個不同反應(yīng)體系中進行的原因是 引物P2與P3可發(fā)生部分堿基互補配對，在同一個體系中無法正常完成復(fù)性過
程引物P2與P3可發(fā)生部分堿基互補配對，在同一個體系中無法正常完成復(fù)性過
程，兩個反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)中不同的是 引物、模板引物、模板。下列序列中符合引物P2與引物P3的5′末端堿基序列要求的是：ADAD。
A.5'ATCGGACTTG?3'
B.5'ATCGGAGAAC?3'
C.5′TAGCCTGAAC?3'
D.5′CAAGTCCGAT?3'
②重組PCR技術(shù)不僅可用于構(gòu)建融合基因，還可用于研究基因定點突變。若要在兩個基因連接處實現(xiàn)基因定點突變，可對 引物P2與P3引物P2與P3進行設(shè)計，后通過重組PCR，使新合成的DNA中含有突變位點，從而實現(xiàn)基因的定點突變。
程
程
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】無以核膜為界限的細胞核；寄生；高溫；升高；磷酸二酯；以形成相同的黏性末端；DNA（半保留）復(fù)制；引物P2與P3可發(fā)生部分堿基互補配對，在同一個體系中無法正常完成復(fù)性過
程；引物、模板；AD；引物P2與P3
程；引物、模板；AD；引物P2與P3
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/10/3 11:0:1組卷：13引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
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