利用酵母菌分解廢紙是一種環(huán)保的方式,但廢紙中的纖維素分子量大不能直接進入酵母菌,且酵母菌無法分解利用環(huán)境中的纖維素。為解決這一難題,科學家將纖維素酶基因通過重組質(zhì)粒導入酵母菌。其所用質(zhì)粒及其酶切位點如圖1,外源DNA上的纖維素酶基因及其酶切位點如圖2.請回答下列問題:
(1)圖1、圖2中的質(zhì)粒和纖維素酶基因分別作為重組DNA技術中的運載體和目的基因運載體和目的基因,為使兩者能夠有效組合,圖中可選用的最合適的限制酶是HindIII和Pst IHindIII和Pst I。
(2)若質(zhì)粒被HindⅢ限制酶識別的序列是-AAGCTT-,并在A與A之間切割。請畫出被切割后所形成的黏性末端。
(3)科學家進一步構建了含3種不同基因片段的重組質(zhì)粒,進行了一系列的研究。圖3是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運輸?shù)氖疽鈭D。
①圖3中已導入重組質(zhì)粒的菌株有菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
②設置菌株Ⅰ作為對照,是為了驗證質(zhì)粒和酵母菌質(zhì)粒和酵母菌均不攜帶纖維素酶基因。
③將4株菌株分別置于以纖維素為唯一碳源唯一碳源的培養(yǎng)基上,其中菌株Ⅰ和菌株Ⅱ菌株Ⅰ和菌株Ⅱ兩個菌株不能存活。
④據(jù)圖推測A基因片段的作用是使纖維素酶可以固定于細胞壁表面使纖維素酶可以固定于細胞壁表面。
【答案】運載體和目的基因;HindIII和Pst I;菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ;質(zhì)粒和酵母菌;唯一碳源;菌株Ⅰ和菌株Ⅱ;使纖維素酶可以固定于細胞壁表面
【解答】
【點評】
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