外泌體是細(xì)胞分泌的一種微小囊泡,其中可含有蛋白質(zhì)、mRNA、DNA片段等生物活性物質(zhì)??蒲腥藛T對(duì)外泌體在乳腺癌細(xì)胞間耐藥信息的傳遞方式進(jìn)行了相關(guān)研究。
(1)獲得乳腺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株MA,并提取其外泌體AE,將AE與乳腺癌細(xì)胞阿霉素敏感株M共培養(yǎng)12h,測(cè)定阿霉素對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。
①可利用熒光標(biāo)記或同位素示蹤熒光標(biāo)記或同位素示蹤技術(shù)示蹤AE的去向。
②AE可以被M細(xì)胞攝取,此過程依賴于細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性。
③比較三組實(shí)驗(yàn)結(jié)果,初步說明AE可向M傳遞耐藥信息,一定程度提高了M細(xì)胞對(duì)阿霉素的耐藥性AE可向M傳遞耐藥信息,一定程度提高了M細(xì)胞對(duì)阿霉素的耐藥性。
(2)研究發(fā)現(xiàn)多耐藥基因(MDR)表達(dá)產(chǎn)物是P-gp,該蛋白有ATP依賴性載體蛋白活性,可將藥物(阿霉素)通過主動(dòng)運(yùn)輸主動(dòng)運(yùn)輸方式轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞外,使細(xì)胞具有耐藥性。
(3)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)M+AE共培養(yǎng)后的M株P(guān)-gp表達(dá)量提高,為探究其原因,科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究,結(jié)果如圖2和圖3所示。已知P-gp半衰期(降解50%所需要的時(shí)間)約為14~17h。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果否定了外泌體僅通過攜帶P-gp的方式傳遞耐藥信息,判斷依據(jù)是P-gp半衰期為14~17h,72h時(shí)AE攜帶的P-gp幾乎完全降解,但M+AE組的P-gp仍顯著高于M組P-gp半衰期為14~17h,72h時(shí)AE攜帶的P-gp幾乎完全降解,但M+AE組的P-gp仍顯著高于M組。推測(cè)可能的其他方式是外泌體通過攜帶MDR的mRNA的方式傳遞耐藥信息外泌體通過攜帶MDR的mRNA的方式傳遞耐藥信息。
(4)下列關(guān)于外泌體的敘述正確的是ABCABC。
A.可參與細(xì)胞間通訊 B.可實(shí)現(xiàn)基因跨細(xì)胞表達(dá) C.可望成為藥物載體 D.不能存在于細(xì)胞內(nèi)液中。
【考點(diǎn)】細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)——流動(dòng)鑲嵌模型;物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞郊捌洚愅?/a>;細(xì)胞生物膜系統(tǒng)的組成及功能.
【答案】熒光標(biāo)記或同位素示蹤;細(xì)胞膜的流動(dòng)性;AE可向M傳遞耐藥信息,一定程度提高了M細(xì)胞對(duì)阿霉素的耐藥性;主動(dòng)運(yùn)輸;P-gp半衰期為14~17h,72h時(shí)AE攜帶的P-gp幾乎完全降解,但M+AE組的P-gp仍顯著高于M組;外泌體通過攜帶MDR的mRNA的方式傳遞耐藥信息;ABC
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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