大豆是重要的油料作物之一,在我國(guó)有悠久的種植歷史。為進(jìn)一步提高大豆的品質(zhì)和含油量,科研人員發(fā)現(xiàn)擬南芥細(xì)胞中存在某種轉(zhuǎn)錄因子能夠明顯提高其他基因的表達(dá)水平。研究人員將從擬南芥細(xì)胞中獲取的轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)移到大豆細(xì)胞內(nèi),并使其過量表達(dá),發(fā)現(xiàn)大豆中油酸和亞油酸的含量顯著提高。圖中限制酶EcoRⅤ的酶切位點(diǎn)為-GAT↓ATC-?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)采用PCR技術(shù)進(jìn)行可以擴(kuò)增目的基因,PCR過程利用的原理是
DNA半保留復(fù)制
DNA半保留復(fù)制
。
(2)質(zhì)粒P0具有氨芐青霉素抗性基因(Ampr)和四環(huán)素抗性基因(Tetr),對(duì)其進(jìn)行切割時(shí)應(yīng)該注意 所選限制酶識(shí)別的序列不能同時(shí)存在于氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中(限制酶不能同時(shí)切割氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因)
所選限制酶識(shí)別的序列不能同時(shí)存在于氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中(限制酶不能同時(shí)切割氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因)
,以便篩選重組質(zhì)粒。研究人員利用限制酶EeoRV對(duì)載體進(jìn)行處理后 不能
不能
(填“能”或“不能”)與目的基因片段直接相連。
(3)P3質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞通常使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,轉(zhuǎn)化指的是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞,并在受體細(xì)胞內(nèi) 維持穩(wěn)定和表達(dá)
維持穩(wěn)定和表達(dá)
的過程,若受體細(xì)胞能夠表現(xiàn)氨芐青霉素抗性,能否說明目的基因已成功導(dǎo)入受體細(xì)胞,并說出理由:不能,有可能是導(dǎo)入了不含目的基因的P0質(zhì)粒
不能,有可能是導(dǎo)入了不含目的基因的P0質(zhì)粒
。
(4)導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞還需經(jīng)過 脫分化
脫分化
和再分化過程,才能形成植株,在此過程中,受體細(xì)胞能夠培育出轉(zhuǎn)基因大豆植株利用的原理是 植物細(xì)胞具有全能性
植物細(xì)胞具有全能性
。
(5)大豆過量表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子后,油酸和亞油酸的含量顯著提高,推測(cè)轉(zhuǎn)錄因子在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮的作用的可能機(jī)理是 調(diào)控與油酸和亞油酸合成有關(guān)酶的基因的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)其合成
調(diào)控與油酸和亞油酸合成有關(guān)酶的基因的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)其合成
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