菊花是兩性花，LFY是控制花分生組織形成的基因，LFY 基因過(guò)量表達(dá)會(huì)使植物開花提前。為使菊花花期提前，科研人員利用過(guò)表達(dá)的擬南芥LFY基因制備轉(zhuǎn)基因菊花，重組Ti質(zhì)粒的部分信息及實(shí)驗(yàn)流程如圖1所示。啟動(dòng)子均為真核生物啟動(dòng)子?；卮鹣铝袉?wèn)題：
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重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌后，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化并篩選LFY轉(zhuǎn)基因菊花。
（1）本實(shí)驗(yàn)中潮霉素的作用是篩選 轉(zhuǎn)入LFY基因的菊花細(xì)胞轉(zhuǎn)入LFY基因的菊花細(xì)胞。步驟①的培養(yǎng)一般 不需要不需要 （填“需要“或“不需要”）光照。圖中Ⅰ中應(yīng)填 愈傷組織愈傷組織。
（2）調(diào)整步驟②和步驟③培養(yǎng)基中 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度和比例可誘導(dǎo)菊花芽或根的形成。
（3）以 菊花染色體DNA菊花染色體DNA為模板，選用LFY基因特異性引物，用PCR檢測(cè)LFY基因是否導(dǎo)入菊花細(xì)胞中。用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花中LFY蛋白的表達(dá)水平，進(jìn)一步篩選轉(zhuǎn)基因菊花.
（4）為避免該LFY轉(zhuǎn)基因菊花中潮霉素抗性基因帶來(lái)潛在的環(huán)境問(wèn)題，可以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案，利用攜帶雙T-DNA的Ti質(zhì)粒（圖2）制備轉(zhuǎn)基因菊花。已知當(dāng)Ti質(zhì)粒存在雙T-DNA時(shí)，兩個(gè)T-DNA可以獨(dú)立整合進(jìn)植物細(xì)胞染色體DNA中。設(shè)計(jì)一個(gè)轉(zhuǎn)基因植物制備和雜交育種相結(jié)合的實(shí)驗(yàn)方法，篩選只表達(dá)FLY的轉(zhuǎn)基因菊花 將LFY基因和潮霉素抗性基因分別克隆到Ti質(zhì)粒的兩個(gè)T-DNA上，構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒；利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化并篩選同時(shí)表達(dá)LFY基因和潮霉素抗性基因的菊花；將轉(zhuǎn)基因菊花自交，在子代中篩選出只表達(dá)FLY的轉(zhuǎn)基因菊花將LFY基因和潮霉素抗性基因分別克隆到Ti質(zhì)粒的兩個(gè)T-DNA上，構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒；利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化并篩選同時(shí)表達(dá)LFY基因和潮霉素抗性基因的菊花；將轉(zhuǎn)基因菊花自交，在子代中篩選出只表達(dá)FLY的轉(zhuǎn)基因菊花。（ 簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路即可）
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】轉(zhuǎn)入LFY基因的菊花細(xì)胞；不需要；愈傷組織；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；菊花染色體DNA；抗原-抗體雜交；將LFY基因和潮霉素抗性基因分別克隆到Ti質(zhì)粒的兩個(gè)T-DNA上，構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒；利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化并篩選同時(shí)表達(dá)LFY基因和潮霉素抗性基因的菊花；將轉(zhuǎn)基因菊花自交，在子代中篩選出只表達(dá)FLY的轉(zhuǎn)基因菊花
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/8/6 8:0:9組卷：7引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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