重組人胰島素是世界上第一個(gè)基因工程藥物，它的使用造福了億萬糖尿病患者。興趣小組探究工程菌的構(gòu)建，實(shí)驗(yàn)所用質(zhì)粒載體如圖所示，其中LacZ基因的表達(dá)產(chǎn)物能將無色反應(yīng)物X-gal水解，從而使菌落呈藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色；Ampr基因的表達(dá)產(chǎn)物分泌到細(xì)胞外發(fā)揮作用。本實(shí)驗(yàn)所用的受體大腸桿菌無LacZ基因。
（1）將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：一般先用 Ca2+Ca2+處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。
（2）雙重篩選培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入 氨芐青霉素氨芐青霉素用以篩選出導(dǎo)入了質(zhì)粒載體的受體菌（轉(zhuǎn)化子），培養(yǎng)基中加入 X-galX-gal用以鑒別出含重組質(zhì)粒的受體菌（重組子）。重組子的菌落顏色是 白色白色，原因是 重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色（答出1點(diǎn)即可）。
（3）某些重組子不能合成胰島素，可能的原因是 兩個(gè)質(zhì)?？赡芊聪蜻B接破壞LacZ基因結(jié)構(gòu)；目的基因與質(zhì)粒反向連接兩個(gè)質(zhì)?？赡芊聪蜻B接破壞LacZ基因結(jié)構(gòu)；目的基因與質(zhì)粒反向連接（答出1點(diǎn)即可）。
（4）長時(shí)間培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)化子形成的菌落周圍出現(xiàn)了一些非轉(zhuǎn)化子形成的較小菌落，這些非轉(zhuǎn)化子菌落形成的原因是 培養(yǎng)時(shí)間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效培養(yǎng)時(shí)間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Ca2+；一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；氨芐青霉素；X-gal；白色；重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色；兩個(gè)質(zhì)粒可能反向連接破壞LacZ基因結(jié)構(gòu)；目的基因與質(zhì)粒反向連接；培養(yǎng)時(shí)間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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