閱讀下面的材料，完成（1）～（4）題。
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品已經(jīng)越來越多地進(jìn)入了人們的生活。2020年7月，兩種國產(chǎn)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物獲得生物安全證書。這是近十年來第二批獲得生物安全證書的國產(chǎn)轉(zhuǎn)基因作物，一種是轉(zhuǎn)epsps和pat基因抗除草劑玉米（DBN9858），另一種是轉(zhuǎn)基因抗除草劑大豆。我國是農(nóng)業(yè)大國，對轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的管理非常嚴(yán)格。根據(jù)我國法規(guī)，除需對國產(chǎn)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物進(jìn)行檢測外，進(jìn)出境的所有農(nóng)產(chǎn)品均需進(jìn)行轉(zhuǎn)基因成分的檢測。
對轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品的檢測方法，目前主要有兩類：一類是以導(dǎo)入外源基因的特定DNA序列為檢測對象；另一類則是以外源基因表達(dá)的蛋白質(zhì)為檢測對象。通常被檢測的特定DNA序列包括兩類：一類是非目的基因序列，主要為載體上通常具有的各種組成元件；另一類被檢測的則是目的基因序列本身。
基因芯片技術(shù)是一種能有效地對轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行檢測的新技術(shù)。以對DBN9858的檢測為例，第一步，針對待測的特定DNA片段設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增出的特定DNA片段帶上標(biāo)記制成探針，經(jīng)變性后通過芯片點(diǎn)樣儀固定到雜交膜上，再經(jīng)過一定的處理，便得到可用于檢測的DNA芯片（如圖1）；第二步，從待測植物中提取DNA作為模板，加入引物進(jìn)行擴(kuò)增；第三步，將擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過變性處理后鋪于芯片表面，放入雜交盒中，在適宜條件下進(jìn)行雜交；第四步，待反應(yīng)結(jié)束后，對芯片進(jìn)行清洗等處理，用儀器檢測芯片上的雜交結(jié)果。利用基因芯片可以實(shí)現(xiàn)一次性高通量快速檢測，是一種具有良好發(fā)展前景的檢測手段。
（1）利用基因芯片可檢測特定DNA序列依據(jù)的是 堿基互補(bǔ)配對堿基互補(bǔ)配對原則。對DBN9858進(jìn)行檢測的基因芯片的陣列設(shè)計(jì)為：第1列為空白對照，第2列固定玉米植株的內(nèi)源基因作為陽性對照，第3列固定與玉米DNA序列高度 非同源非同源（填“同源”或“非同源”）的DNA片段作為陰性對照，第4～6列可分別固定 epsps基因epsps基因、pat基因pat基因、啟動(dòng)子（或終止子、標(biāo)記基因）啟動(dòng)子（或終止子、標(biāo)記基因）進(jìn)行檢測，每列重復(fù)多次以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
（2）制備探針可采用缺口平移法（如圖2），即先利用DNA酶使DNA分子上產(chǎn)生 單鏈單鏈（填“單鏈”或“雙鏈”）缺口，再利用DNA聚合酶具有的核酸外切酶活性和聚合酶活性，在缺口處的5'末端每切除一個(gè)脫氧核苷酸，同時(shí)在3'末端添加一個(gè) 帶標(biāo)記帶標(biāo)記的脫氧核苷酸，最終制成所需探針。
（3）若該基因芯片檢測有效，轉(zhuǎn)基因玉米DBN9858的樣本在芯片的第 24562456列上均應(yīng)出現(xiàn)檢測信號，非轉(zhuǎn)基因玉米則應(yīng)在第 22列上出現(xiàn)檢測信號。若該基因芯片準(zhǔn)備商品化，你認(rèn)為還應(yīng)該在哪些方面進(jìn)一步改進(jìn)？（至少一點(diǎn)）
（4）除了基因檢測，還可以采用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法檢測農(nóng)產(chǎn)品中的蛋白質(zhì)．對轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行檢測時(shí)，常常會(huì)出現(xiàn)假陽性或假陰性的結(jié)果，下列分析合理的是 ACDACD（多選）。
A．某些檢測成分在植物中天然存在，導(dǎo)致檢測出現(xiàn)假陽性結(jié)果
B．PCR引物設(shè)計(jì)復(fù)雜，若引物間發(fā)生結(jié)合，會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果
C．轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中外源基因表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞中被加工、修飾，難以檢測，出現(xiàn)假陰性結(jié)果
D．轉(zhuǎn)基因作物中的外源成分含量低、在加工過程中易變性，導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果
【考點(diǎn)】基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用．
【答案】堿基互補(bǔ)配對；非同源；epsps基因；pat基因；啟動(dòng)子（或終止子、標(biāo)記基因）；單鏈；帶標(biāo)記；2456；2；抗原-抗體雜交；ACD
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：41引用：2難度：0.6
相似題
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1．學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進(jìn)行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個(gè)堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%～15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正常基因的cDNA序列或是有治療價(jià)值的基因（如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具）通過一定的方式導(dǎo)入人體靶細(xì)胞內(nèi)，達(dá)到替代或修復(fù)缺陷基因、治療疾病的目的。導(dǎo)入基因插入位置不當(dāng)、過高或過低表達(dá)，都可能會(huì)導(dǎo)致副作用。盡管基因編輯可以實(shí)現(xiàn)生理水平的基因表達(dá)，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點(diǎn)時(shí)不啟動(dòng)翻譯終止而是繼續(xù)向后進(jìn)行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關(guān)基因發(fā)生無義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設(shè)計(jì)的sup-tRNA表達(dá)載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導(dǎo)入細(xì)胞進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進(jìn)一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導(dǎo)入患病小鼠模型中，實(shí)驗(yàn)顯示能夠降低黏多糖過度積存，實(shí)現(xiàn)對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進(jìn)跨越無義突變位點(diǎn)繼續(xù)翻譯時(shí)引入的氨基酸較為隨機(jī)，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會(huì)影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個(gè)體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應(yīng)用前景。
（1）侵染時(shí)，作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細(xì)胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內(nèi)吞，進(jìn)入細(xì)胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細(xì)胞的催化合成其互補(bǔ)DNA鏈，再經(jīng)過過程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點(diǎn)繼續(xù)向后翻譯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進(jìn)無義突變位點(diǎn)的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻(xiàn)報(bào)道，已在近1000個(gè)不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個(gè)無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計(jì)獨(dú)特的治療策略，這將是一項(xiàng)耗費(fèi)驚人的項(xiàng)目。據(jù)此說明sup-tRNA的應(yīng)用價(jià)值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：26引用：1難度：0.6 -
2．人類基因組計(jì)劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒有抗性的植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫的過程。
（1）圖示以mRNA為材料通過法獲得cDNA，該方法依據(jù)的原理是，通過這種方法獲得的基因中因缺乏和結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致將其直接導(dǎo)入受體細(xì)胞中不能復(fù)制和表達(dá)。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來，構(gòu)建基因表達(dá)載體，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7
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