自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自生固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量。科研人員進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測(cè)定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖1。回答下列問(wèn)題：
（1）步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥赖脑蚴?
在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的固氮菌生長(zhǎng)
在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的固氮菌生長(zhǎng)
；步驟②需充分振蕩的主要目的是 使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中
使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中
。
（2）下表為兩種培養(yǎng)基的配方，步驟④應(yīng)選其中的 Ashby
Ashby
培養(yǎng)基，原因是 該培養(yǎng)基不含氮源具有選擇作用，自生固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈矗琇B培養(yǎng)基中的蛋白胨可以提供氮源，不具有選擇作用
該培養(yǎng)基不含氮源具有選擇作用，自生固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，LB培養(yǎng)基中的蛋白胨可以提供氮源，不具有選擇作用
。
| 培養(yǎng)基類(lèi)型 |
培養(yǎng)基組分 |
| Ashby培養(yǎng)基 |
甘露醇（C6H14O6）、KH2PO4、MgSO4?7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸餾水、瓊脂 |
| LB培養(yǎng)基 |
蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸餾水、瓊脂 |
（3）步驟④所用的接種工具是
涂布器
涂布器
，若在④的平板上統(tǒng)計(jì)的菌落的平均數(shù)量為126個(gè)，則每克土壤中含有的固氮菌為
1.26×107
1.26×107
個(gè)。
（4）將純化的固氮菌置于完全培養(yǎng)液中擴(kuò)大培養(yǎng)48小時(shí)，經(jīng)離心后收集下層細(xì)胞并轉(zhuǎn)移至特定培養(yǎng)基中進(jìn)行固氮能力的測(cè)定，篩選出固氮能力最強(qiáng)的菌種CM12，為進(jìn)一步鑒定其固氮能力，科研人員選用發(fā)芽一致的玉米種子進(jìn)行3組盆栽實(shí)驗(yàn)，30天后測(cè)定土壤微生物有機(jī)氮含量，結(jié)果如圖2。
注：CK：對(duì)照處理組；N：尿素處理組（每盆土壤中50mI.有氮全營(yíng)養(yǎng)液：成分為在1000mL.無(wú)氮植物營(yíng)養(yǎng)液中加入0.12g尿素）；CM12：自生固氮菌CM12處理組（每盆土壤澆50 mL，接種自身固氮菌的無(wú)氮植物營(yíng)養(yǎng)液）。
①對(duì)照組（CK）的處理為
每盆土壤澆50mL無(wú)氮植物營(yíng)養(yǎng)液
每盆土壤澆50mL無(wú)氮植物營(yíng)養(yǎng)液
。
②實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：施用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機(jī)氮含量。與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量增加了約
83.3
83.3
%（保留1位小數(shù)）。
③自生固氨菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，原因是
自生固氮菌能在土壤中獨(dú)立固氮，不受宿主的限制
自生固氮菌能在土壤中獨(dú)立固氮，不受宿主的限制
。
