黑曲霉是一種絲狀真菌，其代謝產(chǎn)物廣泛應用于食品加工等領域?；卮鹣铝袉栴}：
（1）黑曲霉的PDA液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成為：麩皮、豆粉餅、（NH₄）₂SO₄、MgSO₄?7H₂O、KH₂PO₄，培養(yǎng)時需要通氣振蕩，由此可知黑曲霉的代謝類型為

異養(yǎng)需氧型

異養(yǎng)需氧型

；豆粉餅可提供黑曲霉生長所需的

碳源和氮源

碳源和氮源

；若要分離黑曲霉菌落，上述培養(yǎng)基中還需要添加

瓊脂

瓊脂

，在培養(yǎng)基滅菌前需將pH調(diào)至

酸性

酸性

（填“酸性”“中性”或“堿性”）。
（2）計數(shù)黑曲霉菌液孢子濃度的方法為：用多層紗布過濾黑曲霉培養(yǎng)液得到孢子懸浮液，取1mL懸浮液用無菌水逐級稀釋10⁴倍，再取稀釋液滴加至血細胞計數(shù)板（規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm,由400個小格組成）進行計數(shù)，統(tǒng)計得到計數(shù)的小格中平均孢子數(shù)2個，則黑曲霉培養(yǎng)液中孢子濃度為為

8×10¹⁰

8×10¹⁰

個mL^-1。
（3）以大豆為主要原料，利用黑曲霉產(chǎn)生的蛋白酶可將原料中的蛋白質(zhì)水解成

小分子肽和氨基酸

小分子肽和氨基酸

，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制可得到醬油。
（4）黑曲霉發(fā)酵產(chǎn)生的檸檬酸是一種使用廣泛的食品酸度調(diào)節(jié)劑。研究表明，幾丁質(zhì)酶基因chsC沉默與黑曲霉的菌絲形態(tài)和檸檬酸的產(chǎn)量有一定的相關性。利用基因工程技術構建干擾chsC基因表達的載體并導入黑曲霉菌體內(nèi)，上述操作的步驟為：①首先從黑曲霉中提取DNA作為模板，利用

PCR

PCR

技術擴增出chsC基因；構建chsC基因表達的干擾載體時需要用到的工具有

限制酶、DNA連接酶、載體

限制酶、DNA連接酶、載體

；需要將chsC基因

反向

反向

（填“正向”或“反向”）插入到啟動子和終止子之間，以保證轉(zhuǎn)錄出的RNA和chsC基因正常轉(zhuǎn)錄的mRNA互補成雙鏈，從而干擾幾丁質(zhì)酶的合成。②最終可通過

抗原—抗體雜交

抗原—抗體雜交

法鑒定轉(zhuǎn)基因黑曲霉菌體培育是否成功。