將蘇云金芽孢桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中,可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉,其過(guò)程如圖所示(注:農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中)。
(1)通過(guò)從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增或 人工化學(xué)合成人工化學(xué)合成等方法,都可獲取目的基因。
(2)過(guò)程①需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切,使二者的兩端形成 相同的黏性末端相同的黏性末端。為將過(guò)程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái),應(yīng)使用添加含 卡那霉素卡那霉素的培養(yǎng)基。
(3)過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓 T-DNAT-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法除題中所述外,還可采用 基因槍法/花粉管通道法基因槍法/花粉管通道法(寫出一種即可)。
(4)從棉花細(xì)胞到試管苗運(yùn)用的技術(shù)原理是 植物細(xì)胞具有全能性植物細(xì)胞具有全能性。
(5)培育轉(zhuǎn)基因棉的基本原理是讓Bt蛋白的基因在棉花細(xì)胞中 穩(wěn)定和高效的表達(dá)穩(wěn)定和高效的表達(dá),為檢驗(yàn)其是否成功,常用的方法是 讓棉鈴蟲(chóng)攝入該葉片,觀察其存活情況讓棉鈴蟲(chóng)攝入該葉片,觀察其存活情況。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】人工化學(xué)合成;相同的黏性末端;卡那霉素;T-DNA;基因槍法/花粉管通道法;植物細(xì)胞具有全能性;穩(wěn)定和高效的表達(dá);讓棉鈴蟲(chóng)攝入該葉片,觀察其存活情況
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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