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菁優(yōu)網(wǎng)某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后,與用BamHI酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌,結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?;卮鹣铝袉栴}:
(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有
能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因
能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因
(答出兩點(diǎn)即可)。
而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動(dòng)子和終止子。
(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的,其原因是
二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長
二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長
;并且
含有質(zhì)粒載體
含有質(zhì)粒載體
含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒
含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒
的細(xì)胞也是不能區(qū)分的,其原因是
二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長
二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長
。在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有
四環(huán)素
四環(huán)素
的固體培養(yǎng)基。
(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復(fù)制所需的原料來自于
受體細(xì)胞
受體細(xì)胞

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因;二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長;含有質(zhì)粒載體;含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒;二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長;四環(huán)素;受體細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:1074引用:20難度:0.1
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項(xiàng))等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號(hào))。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
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    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
    菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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