為更好地利用農桿菌轉化玉米,科學家將基因編輯系統(tǒng)引入農桿菌Ti質粒對其進行改造。
(1)Ti質粒在基因工程中常作為 載體載體。改造后的Ti質粒的部分序列如圖1所示,轉入玉米細胞后,gRNA能夠與玉米細胞DNA特定位點結合,從而引導Cas9蛋白在此位點切斷 磷酸二酯磷酸二酯鍵斷開DNA。HR1和HR2與玉米DNA切斷位點上下游序列同源,玉米細胞能以同源序列之間的序列為模板合成一段DNA,連接斷開的DNA分子,實現(xiàn)外源片段插入。圖1中插入玉米染色體的片段能穩(wěn)定表達和擴增,其他區(qū)域的基因只能瞬時表達且無法擴增。在轉化玉米的過程中,使用改造后的Ti質粒的優(yōu)點是 能夠在特定位點插入基因片段能夠在特定位點插入基因片段。
(2)用上述改造后的農桿菌轉化玉米幼胚,在培養(yǎng)基中加入除草劑或 卡那霉素卡那霉素均能篩選出已發(fā)生轉化的幼胚。
(3)標記基因插入轉基因作物染色體中往往會影響植物的生長發(fā)育,并帶來環(huán)境安全隱患?,F(xiàn)要制備轉耐寒CXE20基因的轉基因玉米,請利用該方法設計Ti質粒相關序列,選擇相關基因的序號填入Ti質粒部分序列示意圖。 。
①Cas9 ②gRNA ③HRA ④NPTⅡ⑤CXE20 ⑥HR1 ⑦HR2
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】載體;磷酸二酯;能夠在特定位點插入基因片段;卡那霉素;
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:2難度:0.7
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