EV71是引發(fā)手足口病的一種人腸道病毒。為制備抗EV71的單克隆抗體,科研人員用小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
(1)將EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1和VP2作為
抗原
抗原
分別注射到3組小鼠體內(nèi),引發(fā)小鼠機(jī)體的體液
體液
免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。
(2)多次免疫后,分別取上述3組小鼠的血清和未免疫小鼠血清,測(cè)定抗體與抗原的結(jié)合強(qiáng)度,結(jié)果如圖所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗體不是
不是
(填“是”或“不是”)單一抗體,判斷依據(jù)是EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原
EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原
。
②測(cè)定各組小鼠血清與非EV71蛋白結(jié)合強(qiáng)度,目的是排除抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
的影響。
③制備抗EV71單克隆抗體時(shí),選用VP1
VP1
免疫的小鼠脾臟細(xì)胞效果最佳,依據(jù)是第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒(和VP1蛋白),第3組血清抗體無(wú)法特異性結(jié)合EV71病毒,僅能結(jié)合VP2
第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒(和VP1蛋白),第3組血清抗體無(wú)法特異性結(jié)合EV71病毒,僅能結(jié)合VP2
。
(3)取相應(yīng)免疫組小鼠的脾臟,剪碎并用胰蛋白
胰蛋白
酶處理得到小鼠脾臟細(xì)胞,用滅活的病毒誘導(dǎo),與骨髓瘤
骨髓瘤
細(xì)胞融合,篩選獲得5個(gè)不同的雜交瘤細(xì)胞株。
(4)為進(jìn)一步研究抗體的作用效果,科研人員培養(yǎng)上述雜交瘤細(xì)胞株,獲得5種單克隆抗體,分別將它們與等量EV71混合,加入到5組RD細(xì)胞(EV71的宿主細(xì)胞)中,測(cè)定RD細(xì)胞對(duì)EV71的感染率
RD細(xì)胞對(duì)EV71的感染率
,以分析抗體的作用效果。