EV71是引發(fā)手足口病的一種人腸道病毒。為制備抗EV71的單克隆抗體，科研人員用小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
（1）將EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1和VP2作為抗原抗原分別注射到3組小鼠體內(nèi)，引發(fā)小鼠機(jī)體的體液體液免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。
（2）多次免疫后，分別取上述3組小鼠的血清和未免疫小鼠血清，測(cè)定抗體與抗原的結(jié)合強(qiáng)度，結(jié)果如圖所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗體不是不是（填“是”或“不是”）單一抗體，判斷依據(jù)是EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原。
②測(cè)定各組小鼠血清與非EV71蛋白結(jié)合強(qiáng)度，目的是排除抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
③制備抗EV71單克隆抗體時(shí)，選用VP1VP1免疫的小鼠脾臟細(xì)胞效果最佳，依據(jù)是第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒（和VP1蛋白），第3組血清抗體無法特異性結(jié)合EV71病毒，僅能結(jié)合VP2第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒（和VP1蛋白），第3組血清抗體無法特異性結(jié)合EV71病毒，僅能結(jié)合VP2。
（3）取相應(yīng)免疫組小鼠的脾臟，剪碎并用胰蛋白胰蛋白酶處理得到小鼠脾臟細(xì)胞，用滅活的病毒誘導(dǎo)，與骨髓瘤骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選獲得5個(gè)不同的雜交瘤細(xì)胞株。
（4）為進(jìn)一步研究抗體的作用效果，科研人員培養(yǎng)上述雜交瘤細(xì)胞株，獲得5種單克隆抗體，分別將它們與等量EV71混合，加入到5組RD細(xì)胞（EV71的宿主細(xì)胞）中，測(cè)定RD細(xì)胞對(duì)EV71的感染率RD細(xì)胞對(duì)EV71的感染率，以分析抗體的作用效果。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】抗原；體液；不是；EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原；抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果；VP1；第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒（和VP1蛋白），第3組血清抗體無法特異性結(jié)合EV71病毒，僅能結(jié)合VP2；胰蛋白；骨髓瘤；RD細(xì)胞對(duì)EV71的感染率
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：46引用：2難度：0.7
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1．為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療，研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異，篩選有效的免疫治療靶點(diǎn)，制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
（1）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生，選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)，制備免疫小鼠所用的抗原時(shí)，應(yīng)提取區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
（2）將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi)，從該小鼠脾臟中獲取細(xì)胞，誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合，利用篩選得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測(cè)，多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
（3）將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物（CLDN6-DMI）。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI（無關(guān)抗體-DMI）分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞，檢測(cè)細(xì)胞活力，結(jié)果如圖1：
由圖可知，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞，依據(jù)是。
（4）如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制：由圖分析，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是。發(fā)布：2024/12/19 7:0:1組卷：3引用：1難度：0.6 -
2．為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用，某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造，制備了人—鼠嵌合抗體F′，具體流程為：提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA，逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列，將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換，再構(gòu)建表達(dá)載體，在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì)，他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用（F′與F初始濃度相同）時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力，結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/19 1:0:1組卷：39引用：4難度：0.5 -
3．2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/19 6:0:1組卷：42引用：2難度：0.6
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