乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用,ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的關(guān)鍵酶。轉(zhuǎn)反義ACC合成酶基因番茄具有耐儲存、宜運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)。如圖為反義ACC合成酶基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)示意圖,請據(jù)圖回答:
(1)提取ACC合成酶的mRNA時,宜選用成熟番茄的果實(shí)組織,原因是 乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用,ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的關(guān)鍵酶,因此成熟果實(shí)細(xì)胞內(nèi)ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA含量高乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用,ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的關(guān)鍵酶,因此成熟果實(shí)細(xì)胞內(nèi)ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA含量高。以mRNA為模板合成DNA所需的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶,原料是 四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸。
(2)將圖中表達(dá)載體與農(nóng)桿菌菌液混合后,加入含有 卡那霉素卡那霉素的培養(yǎng)基中,可篩選出轉(zhuǎn)化了反義ACC合成酶基因的農(nóng)桿菌。將ACC合成酶基因反向接在35S后構(gòu)成反義ACC合成酶基因,在檢測反義ACC合成酶基因是否整合到番茄植株的染色體DNA上時,不能不能(填“能”或“不能”)用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC合成酶基因片段做探針進(jìn)行檢測,理由是 番茄細(xì)胞內(nèi)存在ACC合成酶基因,能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交番茄細(xì)胞內(nèi)存在ACC合成酶基因,能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交。
(3)圖中35S為特異啟動子,推測35S應(yīng)在番茄的 果實(shí)果實(shí)(器官)中啟動轉(zhuǎn)錄過程。轉(zhuǎn)錄啟動后,檢測發(fā)現(xiàn)番茄果實(shí)中乙烯含量顯著降低,推測反義ACC合成酶基因的作用機(jī)理可能是 反義ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA可與ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA堿基互補(bǔ)配對結(jié)合,ACC合成酶的合成受阻,導(dǎo)致乙烯的產(chǎn)生量下降反義ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA可與ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA堿基互補(bǔ)配對結(jié)合,ACC合成酶的合成受阻,導(dǎo)致乙烯的產(chǎn)生量下降。
【考點(diǎn)】基因表達(dá)載體的構(gòu)建.
【答案】乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用,ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的關(guān)鍵酶,因此成熟果實(shí)細(xì)胞內(nèi)ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA含量高;逆轉(zhuǎn)錄酶;四種脫氧核苷酸;卡那霉素;不能;番茄細(xì)胞內(nèi)存在ACC合成酶基因,能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交;果實(shí);反義ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA可與ACC合成酶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA堿基互補(bǔ)配對結(jié)合,ACC合成酶的合成受阻,導(dǎo)致乙烯的產(chǎn)生量下降
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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