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近年來,生物柴油作為新型能源已經(jīng)成為世界上應(yīng)用最廣泛、發(fā)展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈才镌澹ú僮鬟^程如圖),獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻,并利用地?zé)釓U水培養(yǎng),不僅能生產(chǎn)生物柴油,還能治理地?zé)釓U水。

(1)圖中過程①-②稱為
構(gòu)建cDNA文庫
構(gòu)建cDNA文庫
。
(2)將含有重組載體pMD19-X的大腸桿菌接種到添加X-ga1的培養(yǎng)基上培養(yǎng),一段時間后,應(yīng)該挑選顏色為
白色
白色
的菌落用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),提取質(zhì)粒pMD19-DGAT1。
通過PCR技術(shù)能夠中準(zhǔn)確擴增出目的基因-DGAT1基因的原因是
引物是根據(jù)DGAT1基因兩端的核苷酸序列設(shè)計的,合成的引物能與總DNA中的DGAT1基因特異性結(jié)合
引物是根據(jù)DGAT1基因兩端的核苷酸序列設(shè)計的,合成的引物能與總DNA中的DGAT1基因特異性結(jié)合
。
(3)用限制酶酶切pMD19-DGAT1獲得DGAT1基因,并與酶切后的載體pBI121連接構(gòu)建重組載體并導(dǎo)入到四尾柵藻。DGAT1基因序列兩端無限制酶酶切位點,由表中信息推測擴增DGAT1基因時所用一對引物的一端分別加上的限制酶識別序列是
5’—GGATCC—3’和5’—TCTAGA—3’
5’—GGATCC—3’和5’—TCTAGA—3’
。
限制酶及其識別序列
限制酶 識別
BamHⅠ 5′-GGATCC-3′
3′-CCTAGG-5′
HindⅢ 5′-AAGCTT-3′
3′-TTCGAA-5′
EcoRⅠ 5′-GAATTC-3′
3′-CTTAAG-5′
XbaⅠ 5′-TCTAGA-3′
3′-AGATCT-5′
(4)在篩選出成功導(dǎo)入DGAT1基因表達載體的四尾柵藻細胞后,經(jīng)多次組織培養(yǎng)得到的細胞中仍能提取到DGAT1基因,你認為DGAT1基因是否已成功轉(zhuǎn)化?說明你的觀點及理由
不一定,轉(zhuǎn)化是指將目的基因成功導(dǎo)入受體細胞并穩(wěn)定存在和表達,僅提取到DGAT1基因不能說明它能正常表達
不一定,轉(zhuǎn)化是指將目的基因成功導(dǎo)入受體細胞并穩(wěn)定存在和表達,僅提取到DGAT1基因不能說明它能正常表達
。
(5)研究人員設(shè)計實驗并得到相關(guān)實驗結(jié)果如表2。
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻的地?zé)釓U水各項指標(biāo)測定結(jié)果
各項指標(biāo) 總氮(mg/L) 總磷(mg/L) 氟化物(mg/L)
廢水培養(yǎng)基 23.2 4.32 4.56
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 1.9 0.45 0.84
實驗人員設(shè)計該實驗的目的在于
檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力
檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力
。該實驗
不能
不能
(“能”或“不能”)達到實驗?zāi)康?。若能,請說明理由;若不能,請進一步完善實驗設(shè)計。

【答案】構(gòu)建cDNA文庫;白色;引物是根據(jù)DGAT1基因兩端的核苷酸序列設(shè)計的,合成的引物能與總DNA中的DGAT1基因特異性結(jié)合;5’—GGATCC—3’和5’—TCTAGA—3’;不一定,轉(zhuǎn)化是指將目的基因成功導(dǎo)入受體細胞并穩(wěn)定存在和表達,僅提取到DGAT1基因不能說明它能正常表達;檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力;不能
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:37引用:1難度:0.7
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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