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近年來,生物柴油作為新型能源已經(jīng)成為世界上應(yīng)用最廣泛、發(fā)展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈才镌澹ú僮鬟^程如圖),獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻,并利用地?zé)釓U水培養(yǎng),不僅能生產(chǎn)生物柴油,還能治理地?zé)釓U水。
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(1)圖中過程①-②稱為
構(gòu)建cDNA文庫
構(gòu)建cDNA文庫
。
(2)將含有重組載體pMD19-X的大腸桿菌接種到添加X-ga1的培養(yǎng)基上培養(yǎng),一段時間后,應(yīng)該挑選顏色為
白色
白色
的菌落用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),提取質(zhì)粒pMD19-DGAT1。
通過PCR技術(shù)能夠中準(zhǔn)確擴增出目的基因-DGAT1基因的原因是
引物是根據(jù)DGAT1基因兩端的核苷酸序列設(shè)計的,合成的引物能與總DNA中的DGAT1基因特異性結(jié)合
引物是根據(jù)DGAT1基因兩端的核苷酸序列設(shè)計的,合成的引物能與總DNA中的DGAT1基因特異性結(jié)合
。
(3)用限制酶酶切pMD19-DGAT1獲得DGAT1基因,并與酶切后的載體pBI121連接構(gòu)建重組載體并導(dǎo)入到四尾柵藻。DGAT1基因序列兩端無限制酶酶切位點,由表中信息推測擴增DGAT1基因時所用一對引物的一端分別加上的限制酶識別序列是
5’—GGATCC—3’和5’—TCTAGA—3’
5’—GGATCC—3’和5’—TCTAGA—3’
。
限制酶及其識別序列
限制酶 識別
BamHⅠ 5′-GGATCC-3′
3′-CCTAGG-5′
HindⅢ 5′-AAGCTT-3′
3′-TTCGAA-5′
EcoRⅠ 5′-GAATTC-3′
3′-CTTAAG-5′
XbaⅠ 5′-TCTAGA-3′
3′-AGATCT-5′
(4)在篩選出成功導(dǎo)入DGAT1基因表達載體的四尾柵藻細胞后,經(jīng)多次組織培養(yǎng)得到的細胞中仍能提取到DGAT1基因,你認為DGAT1基因是否已成功轉(zhuǎn)化?說明你的觀點及理由
不一定,轉(zhuǎn)化是指將目的基因成功導(dǎo)入受體細胞并穩(wěn)定存在和表達,僅提取到DGAT1基因不能說明它能正常表達
不一定,轉(zhuǎn)化是指將目的基因成功導(dǎo)入受體細胞并穩(wěn)定存在和表達,僅提取到DGAT1基因不能說明它能正常表達
。
(5)研究人員設(shè)計實驗并得到相關(guān)實驗結(jié)果如表2。
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻的地?zé)釓U水各項指標(biāo)測定結(jié)果
各項指標(biāo) 總氮(mg/L) 總磷(mg/L) 氟化物(mg/L)
廢水培養(yǎng)基 23.2 4.32 4.56
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 1.9 0.45 0.84
實驗人員設(shè)計該實驗的目的在于
檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力
檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力
。該實驗
不能
不能
(“能”或“不能”)達到實驗?zāi)康?。若能,請說明理由;若不能,請進一步完善實驗設(shè)計。

【答案】構(gòu)建cDNA文庫;白色;引物是根據(jù)DGAT1基因兩端的核苷酸序列設(shè)計的,合成的引物能與總DNA中的DGAT1基因特異性結(jié)合;5’—GGATCC—3’和5’—TCTAGA—3’;不一定,轉(zhuǎn)化是指將目的基因成功導(dǎo)入受體細胞并穩(wěn)定存在和表達,僅提取到DGAT1基因不能說明它能正常表達;檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力;不能
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:37引用:1難度:0.7
相似題
  • 1.目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關(guān)的說法,正確的是(  )

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展.
    (1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運載體結(jié)合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運載體有
     
    、
     
     
    等,而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進行篩選.進行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細胞中特異性表達.
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
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    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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