當(dāng)前位置： 2023年遼寧省高考生物適應(yīng)性試卷> 試題詳情

番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）是一類單鏈環(huán)狀DNA病毒，能引發(fā)番茄黃化曲葉病。檢測(cè)某番茄幼苗是否感染該病毒，實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行以下操作：
①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果；②從番茄幼苗組織樣本中提取DNA；③采集番茄幼苗葉片組織樣本；④利用PCR擴(kuò)增DNA片段。
完成下列問(wèn)題：
（1）正確的操作順序是
③②④①
③②④①
（用數(shù)字序號(hào)表示）。
（2）操作②在番茄研磨液中加入2mol/L的氯化鈉，作用是
溶解DNA
溶解DNA
；研磨液中的乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）的作用是
抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解
抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解
。
（3）操作④中使用的酶是
耐高溫的DNA聚合酶
耐高溫的DNA聚合酶
。PCR反應(yīng)中每次循環(huán)可分為
變性
變性
、退火、延伸三步。
（4）PCR擴(kuò)增得到的產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳后的結(jié)果如下：

注：M：DNA marker；1-4：空白對(duì)照、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、樣品
實(shí)驗(yàn)中，DNA marker是一組已知長(zhǎng)度和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA片段的混合物，起
參照
參照
作用。健康番茄幼苗的DNA是陰性對(duì)照組，
TYLCV的DNA
TYLCV的DNA
是陽(yáng)性對(duì)照組。若想利用該樣品植株獲得無(wú)病毒的番茄幼苗，方法是
取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)
取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)
。

【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．

【答案】③②④①；溶解DNA；抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解；耐高溫的DNA聚合酶；變性；參照；TYLCV的DNA；取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進(jìn)行植物組織培養(yǎng)

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：24引用：4難度：0.7

相似題

1．PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理，進(jìn)行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：
（1）PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、

、

。
（2）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化

方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復(fù)制過(guò)程，有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段（稱為岡崎片段），再形成較長(zhǎng)的分子，可推測(cè)參與以上過(guò)程的酶有DNA聚合酶、

、

。在PCR過(guò)程中無(wú)岡崎片段形成，原因是細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的復(fù)制過(guò)程特點(diǎn)是

，PCR過(guò)程的特點(diǎn)是

。
（3）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過(guò)PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端（3'為堿基C）不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段，將以上子鏈 DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到

種不同長(zhǎng)度的子鏈 DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外，還需要加入下列哪組原料

。
A.dGTP，dATP，dTTP
B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP，dATP，dTTP，dCTP
D.ddGTP，ddATP，ddTTP，ddCTP
（4）如圖3為形成單鏈DNA后，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。

催化①過(guò)程的酶是

；核酸酶H的作用是

。如果某RNA單鏈中一共有80個(gè)堿基，其中C有15個(gè)，A與U之和占該鏈堿基含量的40%，經(jīng)過(guò)以上若干過(guò)程后共獲得8個(gè)雙鏈 DNA，此過(guò)程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為

（以上過(guò)程不考慮引物）。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：19引用：1難度：0.7
解析
2．PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理，進(jìn)行生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：

（1）PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、復(fù)性、

。
（2）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)主有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過(guò)PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端（3'為堿基C）不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段，將以上子鏈DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到

種不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外，還需要加入下列哪組原料

。
A．dGTP、dATP、dTTP
B．dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C．dGTP、dATP、dTTP、dCTP
D．ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
（3）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化

方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過(guò)程，有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段（稱為岡崎片段），再形成較長(zhǎng)的分子，可推測(cè)參與以上過(guò)程的酶有DNA連接酶

、

。在PCR過(guò)程中無(wú)岡崎片段形成，原因是細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過(guò)程特點(diǎn)是

，PCR過(guò)程的特點(diǎn)是

。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：12引用：1難度：0.7
解析
3．Sanger法DNA測(cè)序技術(shù)的核心原理：由于雙脫氧核苷酸（ddNTP）的2'和3'都不含羥基，其在DNA的合成過(guò)程中不能形成磷酸二酯鍵，因此可以中斷DNA分子合成反應(yīng)。在四個(gè)含有4種脫氧核苷酸（dNTP）的DNA體外合成反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標(biāo)記的ddNTP（分別為：ddATP，ddCTP，ddGTP和ddTTP），在PCR過(guò)程中復(fù)制隨機(jī)終止，產(chǎn)生四組不同長(zhǎng)度的一系列終止處帶有標(biāo)記的DNA片段。然后在變性凝膠（加入尿素等堿性物質(zhì)）上進(jìn)行電泳和放射自顯影后，可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測(cè)分子的DNA序列，具體過(guò)程見(jiàn)圖。
注：ddA是ddATP的縮寫形式。

（1）如圖1中Ⅰ過(guò)程橫線①中應(yīng)該加入的物質(zhì)是

，dNTP中dATP與ATP在組成上的區(qū)別是

，為什么該過(guò)程中需要添加引物？
（2）材料中提到“在變性凝膠上進(jìn)行電泳……”，請(qǐng)解釋“變性”

，為什么要變性處理？

。
（3）如果電泳結(jié)果如圖2所示，請(qǐng)寫出待測(cè)DNA分子的序列

。
（4）某同學(xué)要通過(guò)PCR技術(shù)獲得被³²P標(biāo)記且以堿基“C”為末端、不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段，在反應(yīng)管中已經(jīng)有模板、引物、酶和相應(yīng)緩沖液等等，還需加入哪些原料

。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：16引用：1難度：0.7
解析

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