為培育矮稈性狀的水稻,科研人員進(jìn)行了下列研究。
(1)科研人員構(gòu)建含T-DNA的重組質(zhì)粒,在T-DNA區(qū)段中含有已知序列的潮霉素抗性基因。將野生型水稻W(wǎng)的愈傷組織浸入含有上述重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌菌液中,20min后轉(zhuǎn)入水稻愈傷組織培養(yǎng)基培養(yǎng),3d后轉(zhuǎn)入含潮霉素潮霉素的培養(yǎng)基中篩選抗性愈傷組織。
(2)將抗性愈傷組織再分化再分化形成水稻幼苗,提取葉片細(xì)胞的總DNA,通過PCRPCR技術(shù)對轉(zhuǎn)基因水稻進(jìn)行分子水平檢測,檢測陽性的移栽到大田,得到T0代轉(zhuǎn)基因水稻。
(3)以(非轉(zhuǎn)基因)水稻W(wǎng)(非轉(zhuǎn)基因)水稻W(wǎng)為對照,對T0代水稻進(jìn)行表現(xiàn)型分析,篩選得到矮稈突變體G。
(4)G自交得T1,從T1代篩選矮稈突變體,T2~T4每代均種植矮稈突變體,各代植株上剪取葉片進(jìn)行潮霉素抗性檢測,統(tǒng)計(jì)T2代和T4代潮霉素抗性和株高表型,得到下表結(jié)果。
潮霉素抗性 | 世代 | 植株數(shù)目 | |
矮稈 | 正常株高 | ||
抗性 | T2 | 259 | 0 |
T4 | 298 | 0 | |
非抗性 | T2 | 0 | 80 |
T4 | 0 | 92 |
分離
分離
定律,表中矮稈植株均表現(xiàn)潮霉素抗性,正常株高植株均表現(xiàn)為潮霉素敏感,說明:T-DNA以單點(diǎn)方式插入到水稻基因組中,使控制株高的基因失活
T-DNA以單點(diǎn)方式插入到水稻基因組中,使控制株高的基因失活
。【考點(diǎn)】基因的分離定律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用.
【答案】農(nóng)桿菌;潮霉素;再分化;PCR;(非轉(zhuǎn)基因)水稻W(wǎng);分離;T-DNA以單點(diǎn)方式插入到水稻基因組中,使控制株高的基因失活
【解答】
【點(diǎn)評】
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