草甘膦是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的除草劑，從某種細(xì)菌中提取草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入棉花植株，獲得抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因棉花。回答下列問題。
（1）從細(xì)菌DNA中提取草甘膦抗性基因時，需要用特定的

限制酶（限制性內(nèi)切核酸酶）

限制酶（限制性內(nèi)切核酸酶）

處理細(xì)菌DNA。提取到的草甘膦抗性基因可通過

PCR

PCR

擴(kuò)增。
（2）草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5′---ATGGCT………AGGAAC---3′
3′---TACCGA………TCCTTG---5′
根據(jù)上述序列，應(yīng)選擇

B、D

B、D

（填字母）作為引物進(jìn)行草甘膦抗性基因的擴(kuò)增。
A.引物：5′-TACCGA-3′
B.引物：5′-GTTCCT-3′
C.引物：5′-AUGGCU-3′
D.引物：5′-ATGGCT-3′
（3）要使草甘膦抗性基因能在受體細(xì)胞中正常表達(dá)，需要利用質(zhì)粒構(gòu)建成

基因表達(dá)載體

基因表達(dá)載體

，不能直接將草甘膦抗性基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是

需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的啟動子、終止子之間

需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的啟動子、終止子之間

。
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法把草甘膦抗性基因?qū)朊藁?xì)胞，脫分化形成

愈傷組織

愈傷組織

后，草甘膦抗性基因沒有表達(dá)，再分化發(fā)育成棉花植株后，草甘膦抗性基因正常表達(dá)，原因是

基因的選擇性表達(dá)

基因的選擇性表達(dá)

。