營養(yǎng)缺陷型菌株是指野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自然突變失去合成某種營養(yǎng)的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營養(yǎng)因子后才能生長(zhǎng)的菌株，包括氨基酸缺陷型菌株、維生素缺陷型菌株和堿基缺陷型菌株等。篩選營養(yǎng)缺陷型菌株的常規(guī)步驟為：誘變育種→淘汰野生型→檢出缺陷型→鑒定缺陷型。
（1）用紫外線誘變大腸桿菌，誘變后常采用選擇培養(yǎng)基淘汰野生型大腸桿菌，使?fàn)I養(yǎng)缺陷型大腸桿菌得以富集。培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至 中性或弱堿中性或弱堿性，再在壓力和溫度分別為 100kPa,121℃100kPa,121℃的條件下進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。
（2）夾層平板培養(yǎng)法可用于營養(yǎng)缺陷型菌株的檢出，其原理如圖1所示，先在培養(yǎng)皿上倒一薄層基本培養(yǎng)基，凝固后再接種一層誘變處理的菌液，其上再澆一層基本培養(yǎng)基，凝固后放入 恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)出菌落，再倒一層完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。若結(jié)果如圖2所示，其中菌落 BB（填“A”或“B”）即為檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株。
（3）研究小組一利用生長(zhǎng)圖譜法初步確定檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌的類型，即在基本培養(yǎng)基乙的A～E這5個(gè)區(qū)域中分別添加不同的營養(yǎng)物質(zhì)，然后用 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法法將檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌接種在圖3培養(yǎng)基上，若培養(yǎng)一段時(shí)間后在圖3的BC交界處長(zhǎng)出了菌落，則說明該菌株是 abab。
a.氨基酸缺陷型菌株
b.維生素缺陷型菌株
c.堿基缺陷型菌株
（4）研究小組二用上述方法鑒定了某菌株屬于維生素營養(yǎng)缺陷型，為了進(jìn)一步確定該菌株的具體類型，他們把15種維生素按照不同組合分為5個(gè)小組，用5個(gè)濾紙片分別蘸取不同小組的維生素，然后覆于接種后的瓊脂平板上培養(yǎng)一段時(shí)間。
| 組別 | 維生素組合 | ||||
| 1 | 維生素A | 維生素B1 | 維生素B2 | 維生素B6 | 維生素B12 |
| 2 | 維生素C | 維生素B1 | 維生素D2 | 維生素E | 煙酰胺 |
| 3 | 葉酸 | 維生素B2 | 維生素D2 | 膽堿 | 泛酸鈣 |
| 4 | 對(duì)氨基苯甲酸 | 維生素B6 | 維生素E | 膽堿 | 肌醇 |
| 5 | 生物素 | 維生素12 | 煙酰胺 | 泛酸鈣 | 肌醇 |
維生素B1
維生素B1
；若菌株為葉酸和生物素的雙營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在圖4培養(yǎng)基上形成菌落的位置是 3與5的交界處
3與5的交界處
。【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．
【答案】中性或弱堿；100kPa，121℃；恒溫培養(yǎng)箱；B；稀釋涂布平板法；ab；維生素B1；3與5的交界處
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/8/8 8:0:9組卷：9引用：2難度：0.6
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1．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測(cè)為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對(duì)SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測(cè)定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對(duì)不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長(zhǎng)
②具有，會(huì)影響對(duì)SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測(cè)定結(jié)果
③缺乏，會(huì)影響SM01的生長(zhǎng)，也無法對(duì)阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測(cè)定．
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對(duì)其計(jì)數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長(zhǎng)規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請(qǐng)回答下列問題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長(zhǎng)出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長(zhǎng)通SO2的時(shí)間，同時(shí)逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長(zhǎng)規(guī)律：在計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計(jì)數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌，通常推測(cè)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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