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馬鈴薯是我國重要的糧食作物之一,致病疫霉導(dǎo)致的晚疫病及干旱、高低溫和鹽脅迫等是導(dǎo)致其減產(chǎn)的重要原因。研究人員為探究StNPR4和StproNPR4基因在馬鈴薯應(yīng)對生物脅迫和非生物脅迫中的功能進(jìn)行了相關(guān)實驗,基因表達(dá)載體構(gòu)建示意圖如圖。
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回答下列問題:
(1)用SacⅡ等限制酶切割含目的基因的DNA片段,與經(jīng)相同酶切割后的pENTR-L16質(zhì)粒用
DNA連接
DNA連接
酶連接,構(gòu)建重組pENTR-L16。
(2)經(jīng)
SacII和Kpn1
SacII和Kpn1
酶將含目的基因的片段切出并連接到載體pOREO4上構(gòu)建重組pOREO4。
(3)經(jīng)
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
法將重組pOREO4導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞,得到5個轉(zhuǎn)化品系,命名為1、2、3、4和5。
A.馬鈴薯基因相對表達(dá)量分析;B.馬鈴薯接種致病疫霉后病原菌相對生物量分析;C.150mmol?L-1的NaCl處理對馬鈴薯快繁生根率的影響;**表示組別間差異達(dá)到極顯著水平
(4)①通過
分子雜交技術(shù)(PCR技術(shù))
分子雜交技術(shù)(PCR技術(shù))
等技術(shù),檢測
轉(zhuǎn)基因不同品系
轉(zhuǎn)基因不同品系
的目的基因轉(zhuǎn)錄水平。據(jù)圖A分析,只有轉(zhuǎn)基因品系
5
5
的表達(dá)量顯著低于野生型(WT)和其余4個轉(zhuǎn)化品系,因此后續(xù)試驗不再檢測此品系。②據(jù)圖B和圖C分析:這樣的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的表達(dá)策略優(yōu)勢是
具有抗病性,致病疫霉相對生物量低;生根率高,存活能力強(qiáng)
具有抗病性,致病疫霉相對生物量低;生根率高,存活能力強(qiáng)
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】DNA連接;SacII和Kpn1;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化;分子雜交技術(shù)(PCR技術(shù));轉(zhuǎn)基因不同品系;5;具有抗病性,致病疫霉相對生物量低;生根率高,存活能力強(qiáng)
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:14引用:3難度:0.5
相似題
  • 1.目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關(guān)的說法,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展.
    (1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運(yùn)載體有
     
    、
     
    、
     
    等,而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進(jìn)行篩選.進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細(xì)胞中特異性表達(dá).
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
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    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴(kuò)增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴(kuò)增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細(xì)胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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