油菜種子可榨油用于食物烹飪，為提高油菜種子含油量，研究人員利用基因工程技術(shù)將酶D基因和轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連得到融合基因，并將該融合基因?qū)胗筒思?xì)胞，從而獲得了含油量極高的轉(zhuǎn)基因油菜新品種，以下為實(shí)驗(yàn)步驟：
（1）研究人員用PCR技術(shù)從基因文庫基因文庫中獲取酶D基因和轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因，這兩種基因中含有三種限制酶（ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ）的切點(diǎn)如圖所示，則用ClaⅠClaⅠ和DNA連接DNA連接酶處理這兩個(gè)基因后，可得到A和DA和D（填字母）端相連的融合基因。
（2）將上述融合基因插入圖中Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中，將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，即可得到含融合基因的農(nóng)桿菌。
（3）將這些農(nóng)桿菌在營(yíng)養(yǎng)液中大量培養(yǎng)，然后剪取油菜的葉片放入其中，此過程即基因工程操作中的將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞這一步驟，此后通過進(jìn)一步篩選，即可獲得轉(zhuǎn)基因油菜葉片細(xì)胞。
（4）將該轉(zhuǎn)基因細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)，可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因文庫；ClaⅠ；DNA連接；A和D；基因表達(dá)載體；四環(huán)素；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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