URA3基因位于酵母菌5號染色體上，編碼的酶參與酵母菌尿嘧啶核苷酸的合成?？蒲腥藛T利用基因工程敲除酵母菌中的URA3基因，以獲得尿嘧啶營養(yǎng)缺陷型酵母菌。敲除過程中利用了PCR技術(shù)，流程如圖所示并回答下列問題：
（1）在PCR過程中，引物的設(shè)計(jì)是關(guān)鍵。除圖示引物A1和B2外，還需設(shè)計(jì)引物A2和B1，才能通過步驟①和②分別獲得A、B片段。引物A2和B1均由40個(gè)核苷酸組成，據(jù)圖分析引物B1的5'端前20個(gè)堿基應(yīng)與 CC互補(bǔ)，后20個(gè)堿基應(yīng)與 BB互補(bǔ)。（填下列選項(xiàng)）
A．A片段的模板鏈
B．B片段的模板鏈
C．引物A2
D．引物B2
（2）在不同階段需要添加不同引物才能獲得正確的擴(kuò)增產(chǎn)物。據(jù)圖分析步驟③和④選用的引物種類（“+”代表選用，“—”代表不選用）
|
引物種類 步驟 |
引物A1 | 引物A2 | 引物B1 | 引物B2 |
| ① | + | + | — | — |
| ② | — | — | + | + |
| ③ | ||||
| ④ |
2
2
次復(fù)制。（4）從獲得的轉(zhuǎn)基因酵母菌中篩選出了多株尿嘧啶營養(yǎng)缺陷型，現(xiàn)需驗(yàn)證這些菌株是因URA3基因缺失而導(dǎo)致的。選擇實(shí)驗(yàn)材料寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路。
實(shí)驗(yàn)材料：轉(zhuǎn)基因酵母菌、完全培養(yǎng)基、尿嘧啶缺陷型培養(yǎng)基、含URA3基因的重組質(zhì)粒、不含URA3基因的空質(zhì)粒實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路：
將轉(zhuǎn)基因酵母菌隨機(jī)分為兩組，一組導(dǎo)入含有URA3基因的重組載體，一組導(dǎo)入不含URA3基因的空質(zhì)粒，再將兩組酵母菌接種到尿嘧啶缺陷型培養(yǎng)基，觀察生長的狀況
將轉(zhuǎn)基因酵母菌隨機(jī)分為兩組，一組導(dǎo)入含有URA3基因的重組載體，一組導(dǎo)入不含URA3基因的空質(zhì)粒，再將兩組酵母菌接種到尿嘧啶缺陷型培養(yǎng)基，觀察生長的狀況
。【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；基因工程的操作過程綜合．
【答案】C；B；2；將轉(zhuǎn)基因酵母菌隨機(jī)分為兩組，一組導(dǎo)入含有URA3基因的重組載體，一組導(dǎo)入不含URA3基因的空質(zhì)粒，再將兩組酵母菌接種到尿嘧啶缺陷型培養(yǎng)基，觀察生長的狀況
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/24 14:0:35組卷：4引用：1難度：0.6
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1．以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù)，其中說法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
2．科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因（SLA-2基因），構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體，進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1，SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請回答：
（1）過程①中，PCR擴(kuò)增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應(yīng)選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是，該過程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對真核細(xì)胞進(jìn)行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個(gè)濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒有抗性的細(xì)胞死亡又不會(huì)讓。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：41引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn)，說法錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
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