Cre酶是一種重組酶，LoxP是能被Cre酶識別的特異DNA序列。Cre/LoxP重組酶系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特異位點的基因敲除、基因插入等操作。
（1）一般而言，當(dāng)一條DNA鏈上存在兩個相同的LoxP序列且方向相同時，Cre酶能有效切除兩個位點間的DNA序列，如圖1所示。
①Cre酶與限制酶的功能類似，能將特定部位的兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵斷開。
②在無Cre酶存在的細胞中，轉(zhuǎn)錄終止信號序列抑制下游GFP基因起作用，無法發(fā)出熒光。若細胞中含有Cre酶，Cre酶就會 切除轉(zhuǎn)錄終止信號序列切除轉(zhuǎn)錄終止信號序列，GFP基因就會 轉(zhuǎn)錄和翻譯（或“表達“）轉(zhuǎn)錄和翻譯（或“表達“），合成綠色熒光蛋白。
（2）當(dāng)細胞中存在多對Cre酶識別位點和熒光基因時，只有在啟動子之后且與啟動子相鄰的熒光蛋白基因才會表達，借助大腦成像技術(shù)，通過熒光蛋白“點亮”大腦內(nèi)的神經(jīng)元，小鼠不同的腦組織細胞就會呈現(xiàn)不同的顏色，出現(xiàn)“腦彩虹”。
①研究者利用 限制酶和DNA連接限制酶和DNA連接酶構(gòu)建了含有熒光蛋白基因和Cre酶識別序列的基因表達載體（如圖2），利用 顯微注射顯微注射法將其導(dǎo)入小鼠細胞中，進而培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。
②若該小鼠腦細胞中不存在Cre酶，小鼠腦組織呈現(xiàn)的色彩為 綠色綠色。
③若該小鼠腦細胞中存在Cre酶時，該小鼠一個腦細胞的色彩為 綠色或紅色或黃色或藍色綠色或紅色或黃色或藍色。
（3）兩個LoxP序列位于一條DNA鏈上且方向相反時，Cre酶能誘導(dǎo)兩個LoxP位點間的序列翻轉(zhuǎn)。請在圖3中畫出僅通過序列翻轉(zhuǎn)就能在腦組織中同時呈現(xiàn)四種顏色的基因表達載體模式圖（用最少的LoxP序列）。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】磷酸二酯鍵；切除轉(zhuǎn)錄終止信號序列；轉(zhuǎn)錄和翻譯（或“表達“）；限制酶和DNA連接；顯微注射；綠色；綠色或紅色或黃色或藍色
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：17引用：1難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
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