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菁優(yōu)網(wǎng)H18雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過程中的凋亡現(xiàn)象制約著生產(chǎn)能力的提高.通過基因工程可改造H18雜交瘤細(xì)胞的抗凋亡能力,相關(guān)步驟如下:
①細(xì)胞培養(yǎng):將人肝癌細(xì)胞在含10%小牛血清的培養(yǎng)液中培養(yǎng).一段時(shí)間后,用胰蛋白酶處理培養(yǎng)液,漂洗后調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為1×107個(gè)?mL-1
②免疫小鼠:向小鼠體內(nèi)注射肝癌細(xì)胞懸液0.8mL,以后每隔2周免疫1次,共3次,最后一次免疫后3天,取脾臟制成細(xì)胞懸液備用.
③細(xì)胞融合及篩選:將脾臟細(xì)胞懸液和骨髓瘤細(xì)胞懸液在50%PEG作用下進(jìn)行融合,篩選出能產(chǎn)生抗人肝癌單克隆抗體HAb18的H18雜交瘤細(xì)胞.
④改造H18雜交瘤細(xì)胞:利用PCR技術(shù)獲得小鼠的bcl-XL基因(抗凋亡基因),構(gòu)建表達(dá)載體,通過脂質(zhì)體法導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞,再篩選出抗凋亡能力明顯提高的H18雜交瘤細(xì)胞.
請(qǐng)分析回答:
(1)步驟①肝癌細(xì)胞合成培養(yǎng)液中特有的成分是
血清(血清、血漿)
血清(血清、血漿)
,培養(yǎng)液中還需加入一定量抗生素的目的是
防止雜菌污染
防止雜菌污染

(2)步驟②中,肝癌細(xì)胞免疫小鼠需在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次,其目的是
刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞
刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞

(3)步驟③中,除了用50%PEG促進(jìn)細(xì)胞融合外,常用的生物誘導(dǎo)因素是
滅活的病毒
滅活的病毒
,物理誘導(dǎo)方法有
電刺激(振蕩或離心)
電刺激(振蕩或離心)
(寫出一種即可).步驟④中通過脂質(zhì)體法能將表達(dá)載體導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞依賴的原理是
膜的流動(dòng)性
膜的流動(dòng)性

(4)與普通抗肝癌藥物相比,用抗人肝癌單克隆抗體HAb18與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌的主要優(yōu)點(diǎn)是
能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量
能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量

(5)乙醇有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用.為了建立H18雜交瘤細(xì)胞凋亡檢測(cè)模型,科研人員利用不同濃度的乙醇溶液誘導(dǎo)H18雜交瘤細(xì)胞凋亡,其結(jié)果如圖所示.抗凋亡細(xì)胞株的建立與篩選應(yīng)選擇的誘導(dǎo)條件是
C
C
(用圖中字母表示).

【答案】血清(血清、血漿);防止雜菌污染;刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞;滅活的病毒;電刺激(振蕩或離心);膜的流動(dòng)性;能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量;C
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:13引用:3難度:0.3
相似題
  • 1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
    (1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
     
    區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
    (2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
     
    細(xì)胞,誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合,利用
     
    篩選得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè),多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
    (3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無(wú)關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
     
    。
    (4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是
     

    發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6
  • 2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì),他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(  )菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
  • 3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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